آنزیم پروتئیناز K برند ATR-MEDProteinase K

آنزیم پروتئیناز K برند ATR-MED

توضیحات کلی

آنزیم پروتئیناز K برند ATR-MED یا اندوپپتیداز K (PK) از قارچ تریتیراکیوم آلبوم یک پروتئین 40 کیلو دالتونی است. ناحیه پرو پپتیدی N ترمینال همسانی با سوبتیلیسین subtilisin باکتریایی را نشان می‌دهد. پروتئیناز K یک سیستم پروتئینی کارآمد برای مهندسی پروتئین است. پروتئاز فوت پرینتینگ با هضم پروتئیناز K می‌تواند اینتراکشن سطح پروتئین با پروتئین را نشان دهد.

از آنزیم پروتئیناز K یا اندوپپتیداز K برند سیگما-آلدریچ در مرحله قبل از هیبریداسیون جنین مرغ استفاده شده است. همچنین از این آنزیم پروتئیناز برای افزایش پروتئین پریونی اسکارپی (PrPSc) در گوسفند، همستر و موش استفاده شده است.

کاربرد

از اندوپپتیداز K در موارد زیر استفاده شده است:

• برای غیرفعال کردن پروتئولیتیک نوکلئازها در طول جداسازی DNA و RNA استفاده می‌شود.
• اندوتوکسین‌هایی که به پروتئین‌های کاتیونی مانند لیزوزیم و ریبونوکلئاز A متصل می‌شوند، را حذف می‌کند.
• برای جداسازی میتوکندری‌های کبدی، مخمر و ماش مفید استفاده شده است.
• برای تعیین محلی قرارگیری آنزیم‌ها بر روی غشاء استفاده شده است.
• تیمار بافت پارافینه با آنزیم Proteinase K جهت فراهم نمودن محل‌های جایگاه‌های آنتی‌ژن برای لیبلینگ آنتی‌بادی
• هضم پروتئین‌های نمونه‌های بافت مغزی با آنزیم Proteinase K برای پری نون ها در تحقیقات آنسفالوپاتی اسفنجی قابل انتقال (TSE)

عملکرد بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی

پروتئیناز K اختصاصیت گسترده‌ای دارد و بسیاری از پروتئین‌ها به‌راحتی در حالت نیتیو تخریب می‌کند. این آنزیم عمدتاً پیوند پپتید مجاور گروه کاربوکسیل اسیدآمینه‌های آلیفاتیک و آروماتیک را با گروه‌های آمینو مسدود شده می‌شکند. pH مطلوب برای فعالیت این آنزیم  بین 7.5-9.0 است و نقطه ایزو الکتریک 8.9 است.

آنزیم پروتئیناز K جهت فعال‌سازی به یون کلسیم 1-5 میلی مولار نیاز دارد. پروتئیناز K توسط دی ایزوپروپیل فلوئور فسفات (DFIP) و فنیل متیل سولفونیل فلوراید (PMSF) مهار می‌شود. نتایج حاصل از مطالعات ساختار کریستالی و مولکولی نشان می‌دهد که آنزیم پروتئیناز متعلق به خانواده subtilisin با یک جایگاه فعال سه‌گانه کاتالیزوری (Asp39-His69-Ser224) است.

آنزیم پروتئیناز در طیف متنوعی از محلول‌ها ازنظر pH بافرهای نمکی، دترجنت‌ها (SDS) و دما است. فعالیت پروتئیناز K در حضور سدیم دودسیل سولفات (SDS) 1/0 تا 5/0درصد، حفظ شده و انواع پروتئین‌ها و نوکلئازها را در فرآیندی استخراج و تخلیص DNA حذف می‌کند بدون اینکه تأثیری بر یکپارچگی DNA جدا شده داشته باشد.

دمای نگه‌داری

دمای 20- درجه سانتی‌گراد

قیمت خرید آنزیم پروتئیناز K برند ATR-MED و یا فروش آنزیم پروتئیناز کا برند ATR-MED