کشت سلولی یکی از تکنیک‌های مهم در علوم زیستی است که برای ریمو کردن سلول‌ها، بافت‌ها یا اندام‌ها از حیوانات یا گیاهان و قرارگیری بعدی آن‌ها در یک محیط مصنوعی که منجر به بقا و یا تکثیر سلول ها باشد، استفاده می‌شود. الزامات پایه محیطی برای رشد بهینه سلول‌ها عبارت‌اند از: دمای کنترل‌شده، بستر اتصال سلول و محیط رشد مناسب و دستگاه انکوباتور مناسب که pH و اسمالیته بودن صحیح را حفظ می‌کند.
مهم‌ترین و حیاتی‌ترین مرحله در کشت سلولی، انتخاب محیط رشد مناسب برای کشت آزمایشگاهی است. محیط رشد یا محیط کشت یک مایع یا ژل است که برای حمایت از رشد میکروارگانیسم‌ها، سلول‌ها یا گیاهان کوچک طراحی‌شده است.
محیط‌های کشت سلولی به‌طورکلی منبع مناسبی از انرژی و ترکیباتی را تشکیل می‌دهند که چرخه سلولی را تنظیم می‌کنند. یک محیط کشت معمولی از مجموعه‌ای از اسیدهای آمینه، ویتامین‌ها، نمک‌های معدنی، گلوکز و سرم به‌عنوان منبع رشد، هورمون‌ها و فاکتورهای رشد تشکیل‌شده است. علاوه بر تامین مواد مغذی، سرم به حفظ pH محیط کشت و اسمولالیته نیز کمک می‌کند.
سلول‌های حیوانی را می‌توان با استفاده از یک محیط کاملاً طبیعی یا یک محیط مصنوعی / سنتتیک به همراه برخی محصولات طبیعی کشت داد.
| Media Type |
Examples |
Uses | |
| Natural media | Biological Fluids | plasma, serum, lymph, human placental cord serum, amniotic fluid | |
| Tissue Extracts | Extract of liver, spleen, tumors, leucocytes and bone marrow, extract of the bovine embryo and chick embryo | ||
| Clots | coagulants or plasma clots | ||
| Artificial media | Balanced salt solutions | PBS, DPBS, HBSS, EBSS | Form the basis of complex media |
| Basal media | MEM DMEM | Primary and diploid culture | |
| Complex media | RPMI-1640, IMDM | Supports a wide range of mammalian cells |
محیط‌های کشت طبیعی فقط از مایعات بیولوژیکی طبیعی تشکیل‌شده‌اند. محیط‌های کشت طبیعی برای طیف گسترده‌ای از کشت سلول‌های حیوانی بسیار مفید و مناسب هستند. مهم‌ترین نقطه‌ضعف محیط‌های کشت طبیعی، قابلیت تکثیر ضعیف آن به دلیل عدم آگاهی از ترکیب دقیق این محیط‌های کشت طبیعی است.
محیط‌های کشت مصنوعی یا سنتتیک با اضافه کردن مواد مغذی (اعم از آلی و معدنی)، ویتامین‌ها، نمک‌ها، گازهای O2 و CO2، پروتئین‌های سرم، کربوهیدرات‌ها، کوفاکتورها تهیه می‌شوند. محیط‌های کشت مصنوعی مختلفی برای ارائه یک یا یکی از اهداف زیر تولیدشده است:
سرم گاوی FBS یا Fetal Bovine Serum شایع‌ترین مکمل در محیط کشت سلولی حیوانات است. به‌عنوان یک مکمل کم‌هزینه برای تهیه یک محیط کشت بهینه استفاده می‌شود. سرم به‌عنوان حامل‌ها یا شلاتور برای مواد مغذی محلول و غیر محلول در آب، هورمون‌ها، فاکتورهای رشد و مهارکننده‌های پروتئاز عمل می‌کند و خنثی‌کننده مواد سمی می‌باشد.
وجود سرم در محیط‌های کشت دارای اشکالات زیادی است و می‌تواند به تفسیرهای اشتباه در مطالعات ایمونولوژیکی منجر شود. تعدادی از محیط‌های کشت بدون سرم تولیدشده‌اند. این محیط‌های کشت (محیط کشت سلول های بنیادی) به‌طورکلی برای حمایت از کشت یک نوع سلول واحد، مانند Knockout Serum Replacing و Knockout DMEM از شرکت Thermo Fisher Scientific و محیط کشت mTESR1 از شرکت Stem Cell Technologies برای کشت سلول‌های بنیادی دارای مقادیر مشخص‌شده از فاکتورهای رشد خالص، لیپوپروتئین‌ها و پروتئین‌های دیگر (که در محیط‌های دیگر معمولاً توسط سرم تهیه می‌شوند) تهیه‌شده‌اند. ازآنجاکه اجزای موجود در این محیط‌های کشت شناخته‌شده‌اند، از این محیط‌های کشت به‌عنوان «محیط‌های کشت تعریف‌شده» نیز یاد می‌شود.
این محیط‌های کشت حاوی مواد معدنی و آلی فوق‌العاده خالص و بدون آلودگی هستند و ممکن است حاوی مواد افزودنی خالص پروتئین باشند. این ترکیبات توسط مهندسی ژنتیک با افزودن ویتامین‌ها، کلسترول، اسیدهای آمینه خاص و اسیدهای چرب در باکتری‌ها یا مخمرها تولید می‌شوند.
محیط‌های کشت بدون پروتئین حاوی پروتئین نیستند و فقط حاوی ترکیبات غیر پروتئینی هستند. در مقایسه با محیط‌های کشت حاوی سرم، استفاده از محیط‌های کشت بدون پروتئین باعث رشد بهتر سلول و بیان پروتئین می‌شود و تخلیص پایین‌دستی از هر محصول بیان‌شده را تسهیل می‌کند. فرمولاسیون‌هایی مانند محیط کشت سلولی MEM ،RMPI-1640 ،DMEM فاقد پروتئین هستند و در صورت لزوم مکمل پروتئین تهیه می‌شود.
محیط های کشت سلول به سه شکل به صورت تجاری در دسترس است:
پودر محیط کشت سلول ارزانترین نوع محیط کشت سلول قیمت است اما باید قبل استفاده استریل شود. توصیه می شود قبل از افزودن سرم ، پودر را فیلتر و ضدعفونی کنید زیرا کفهایی که در حضور سرم وجود دارد، پروتئین را دناتوره می کند. سرمهای گاوی یا اسب می توانند بعد از فیلتراسیون اضافه شوند. محیط های کشت سلول همیشه باید با قرار دادن آن در انکوباتور CO2 در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 72 ساعت قبل از استفاده، از نظر عدم استریله بودن مورد آزمایش قرار بگیرند تا اطمینان حاصل شود که مقدار زیادی بدون آلودگی وجود دارد و باید در دمای 4 درجه سانتیگراد ذخیره شود. از آنجا که چندین مؤلفه محیط نسبت به نور حساس است، باید در تاریکی ذخیره شود.
تعویض محیط کشت سلول: با توجه به نوع سلول وسرعت رشد آن باید هر ۲۴ تا ۴۸ ساعت یکبار محیط درون فلاسک تعویض شود. وجود فنل رد در محیط کشت شناسگر pH محیط بوده و محیط کشت سلولی با رنگ زرد به معنای اسیدی شدن محیط کشت بعلت مصرف گلوکز توسط سلول ها، بالا بودن غلظت دی اكسید كربن، رشد بیش از حد سلول ها یا آلودگی میكروبی می باشد و ارغوانی شدن محیط كشت در اثر كم بودن غلظت دی اكسید كربن یا بست بودن در فلاسك های بدون فیلتر می باشد که در هر دو صورت باید محیط کشت تعویض گردد.
امیدواریم که این مطالب برای شما عزیزان مفید بوده باشد. لطفا نظرات، پیشنهادات و انتقادات ارزشمند خود را با ما در میان بگذارید.
برای رویت قیمت آنلاین انواع محیط کشت سلول و سهولت در امر خرید اینترنتی انواع محیط کشت در سایت ما عضو شوید و همواره از پیشنهادهای ویژه ما برخوردار باشید.
در صورت داشتن هرگونه راهنمایی و سوالاتی از قبیل: محیط های کشت سلول بنیادی، سرطانی، گیاهی، ph، قیمت، خرید و یا فروش انواع محیط کشت و … از طریق راه های ارتباطی با ما تماس بگیرید.
فروشگاه ATR-MED، با تشکیل تیمی از نخبگان کشور (عضو بنیاد ملی نخبگان و دارای مقالات علمی متعدد ثبت‌شده در مجلات معتبر) که ارتباط نزدیک علمی با مراکز تحقیقاتی و دانشگاهی اروپا و آمریکایی را دارد، فعالیت خود را به‌طور تخصصی در زمینه فروش آنلاین جامع محصولات علوم زیستی و خدمات آزمایشگاهی ارائه می دهد.
تمامی حقوق این وب سایت در اختیار آثل طب راد مد ایرانیان (ATR-MED) بوده و استفاده از محتوای آن تنها با درج منبع امکان پذیر می باشد.
