نقد و بررسی
TCEP
TCEP
توضیحات کلی
TCEP یک جامد غیر فرار و یک عامل احیاکننده قوی است که میتوان آن را با هیدرولیز اسیدی تریس (2-سیانو اتیل) فسفین در HCl حلال سنتز کرد. در تخلیص پروتئینها، TCEP یک عامل شلاتور مفید برای یونهای مختلف و فلزات سنگین مانند روی، سرب، سرب، کادمیم و نیکل است.
اغلب بهعنوان نمک هیدروکلراید (TCEP-HCl) با وزن مولکولی 286.65 گرم در مول تهیه و استفاده میشود. این ماده در آب محلول است و بهعنوان محلول تثبیتشده در pH خنثی در دسترس است و برای تسهیل حذف عامل کاهنده روی یک تکیهگاه آگارز تثبیت میشود.
TCEP اغلب بهعنوان یک عامل کاهشدهنده برای شکستن پیوندهای دی سولفیدی در داخل و بین پروتئینها بهعنوان یک مرحله آمادهسازی برای الکتروفورز ژل استفاده میشود.
در مقایسه با دو عامل رایج دیگر که برای این منظور استفاده میشوند (دی تیوتریتول و β-مرکاپتواتانول)، تی سی ای پی دارای مزایای بیبو بودن، یک عامل کاهنده قویتر، یک عامل کاهنده برگشتناپذیر است (به این معنا که TCEP بازسازی نمیشود – درنهایت). محصول برش دی سولفید باواسطه تی سی ای پی درواقع دو تیول/سیستئین آزاد است که آبدوست تر است و در برابر اکسیداسیون در هوا مقاومتر است.
TCEP فقط در حلالهای آلی ازجمله متانول و اتانول دارای حداقل حلالیت است.
کاربرد TCEP
- بهعنوان یک عامل کاهنده برای احیای سولفوکسیدها، سولفونیل کلریدها، N-اکسیدها و آزیدها. همچنین میتوان از آن در واکنش سیکلوافزودن آزید-آلکین در حضور کاتالیزور مس استفاده کرد.
- برای کاهش پیوندهای دی سولفیدی در پروتئینهای مختلف.
- بهعنوان یک معرف برای احیای انتخابی دی سولفیدها در آب.
- برای حذف کاتالیزورهای متاتز مشتق از روتنیوم از طریق شستشوی آبی مخلوط واکنش خام هنگامیکه بازیافت میشود.
- بهعنوان یک عامل احیاکننده برای احیای آلکیل دی سولفیدهای مختلف مانند ترانس-4،5-دی هیدروکسی-1،2-دیتیان.
- معرف محلول در آب، برای احیای انتخابی دی سولفیدها استفاده میشود. پایدارتر از DTT و در کاربردهای طیفسنجی جرمی مفید است.
- تی سی ای پی اغلب بهعنوان یک عامل کاهشدهنده برای شکستن پیوندهای دی سولفیدی در داخل و بین پروتئینها بهعنوان یک مرحله آمادهسازی برای الکتروفورز ژل استفاده میشود.
- تی سی ای پی همچنین در فرآیند همگنسازی بافت برای جداسازی RNA استفاده میشود.
دمای نگهداری
2-8 درجه سانتی گراد
0رای کاربران