کیت آنزیم DNase IDNase I

توضیحات کلی – Dnase چیست

کیت آنزیم DNAse I برند ATR-MED یک اندونوکلئاز جداشده از پانکراس گاو است که DNA دو رشته‌ای و تک‌رشته‌ای را به الیگو و مونونوکلئوتیدها هضم می‌کند.  از DNase پانکراس گاو چهار ایزوآنزیم A ، B ، C و D با نقاط ایزوالکتریک 5.22، 4.96، 5.06 و 4.78 وجود دارد. شکل غالب DNase پانکراس گاو ایزوآنزیم A است.

از این ماده برای ایجاد نیک در DNA به‌عنوان اولین قدم برای ادغام بازهای لیبل شده در DNA استفاده می‌شود. کیت آنزیم DNAse 1 برند ATR-MED در روند جداسازی وزیکول‌های غشای پلاسمایی از کشت Neurospora crassa استفاده شده است. همچنین از این محصول به همراه تریپسین برای تهیه سوسپانسیون تک‌سلولی از بیضه‌های موش استفاده شده است. در یک مطالعه از این آنزیم برای مقایسه چندین روش برای کاهش آلودگی RNase در آماده‌سازی DNase استفاده شده است و همچنین در یک مطالعه به‌منظور بررسی تأثیر ترکیبات سدیم دودسیل سولفات (SDS) بر رﻧﺎﭼﻮره شدن آنزیم پس از الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید استفاده شده است. از ماده اشاره شده برای حذف DNA از نمونه‌های پروتئین استفاده می‌شود.

همچنین شما می توانید انواع محصولات بیولوژی مولکولی را در سایت آثل طب مشاهده نمایید.

اجزا تشکیل دهنده کیت آنزیم DNase I

•  DNase I, RNase-free 1U/µL 1000unit (#ATR-N703)
• 10X Reaction Buffer with MgCl2 1 mL
• EDTA (50 mM) 1 mL

کاربرد

• ادغام بازهای لیبل شده در DNA: نیک DNA
• لیبلینگ رادیواکتیو
• در روش‌های بیوپروسسینگ: حذف DNA
• حذف DNA ژنومی در جداسازی RNA قبل از RT-PCR
• رونویسی در شرایط آزمایشگاهی
• ترجمه نیک DNA
• DNase فوت‌پیرینتینگ
• تنظیم اکتین برای پلیمریزاسیون اکتین در سلول‌ها
• اتصال متقابل UV پروتئین‌ها به اسیدهای نوکلئیک
• DNase در تنظیم پلیمریزاسیون اکتین در سلول‌ها نقش دارد و در روند آپوپتوز نقش دارد
• برای حذف DNA از نمونه‌های پروتئین استفاده می‌شود.

عملکرد بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی

DNase 1 یک اندونوکلئاز است که با عملکرد در پیوندهای فسفو دی استر مجاورت پیریمیدین‌ها پلی نوکلئوتیدی‌هایی با ترمینال 5-فسفات ایجاد می‌کند. با حضورMg²⁺ ، DNAse I هر رشته DNA را به‌طور مستقل برش می‌دهد و سایت‌های برش تصادفی هستند. هر دو رشته DNA در حضور ⁺Mg² تقریباً در همان محل برش می‌شوند. کاتیون‌های دو ظرفیتی مانندMg² ، Ca²⁺، CO₂ و ⁺Zn² فعال‌کننده این آنزیم هستند. غلظت 5 میلی مولار ⁺Ca² آنزیم را در مقابل هضم پروتئولیتیک حفاظت می‌کند. pH مطلوب بین 7 تا 8 است. ماده فوق‌الذکر از پانکراس گاو از چهار جزء کروماتوگرافی قابل‌تشخیص، A ، B ، C و D تشکیل شده است که نسبت‌های مولی آن‌ها به ترتیب 1:1:4 است. فقط مقادیر جزئی از ایزوآنزیم D وجود دارد. 2-مرکاپتواتانول، شلاتورها ، سدیم دودسیل سولفات (SDS) و اکتین از مهارکنندگان فعالیت آنزیم DNase I شناخته‌شده‌اند.

این آنزیم با درجه خلوص حداقل 85% و فعالیت  1000 یونیت ارائه شده است.

دمای نگه‌داری

دمای 20- درجه سانتی‌گراد