نقد و بررسی
بافر TAE 50X
بافر TAE 50X
توضیحات کلی
بافر TAE (Tris- Acetate-EDTA) 50X بهطور گستردهای برای جداسازی اسیدهای نوکلئیک در الکتروفورز ژل افقی و گاهی اوقات در ژل پلی آکریل آمید عمودی استفاده میشود. tae 50x buffer برای وضوح بالای الکتروفورز قطعات اسید نوکلئیک بلند (بیشتر از 1500 جفت باز) روی ژل آگارز مناسب است. ظرفیت بافری کمتری نسبت به بافر تریس-بورات-ادتا دارد. به طور کلی، قطعات اسید نوکلئیک در ژل های دارای بافر Tris- Acetate-EDTA کندتر حرکت می کنند به غیر از dsDNA خطی، که تمایل دارد در بافر TAE سریعتر ران شود. بافر TAE یا تریس-استات-ادتا برای الکتروفورز ژل آگارز قطعات DNA با اندازه متوسط از 300 جفت باز تا 20 کیلوباز قابل استفاده است. بافر تریس-استات-ادتا همچنین برای تجزیه و تحلیل RNA نیتیو (غیر دناتوره کننده) و در ژل های دناتوره کننده به جای بافر MOPS با استفاده از نمونه های RNA دناتوره شده در فرمامید داغ استفاده می شود.
تفاوت بافر TBE و TAE
در این است که بافر TBE برای الکتروفورز با ولتاژ بالا (> 150 ولت) مناسبتر است زیرا ظرفیت بافری بالاتر و رسانایی کمتری نسبت به بافر TAE دارد. بافر TBE از ترکیب تریس بیس Tris base، استیک اسید و نمک 2 آبه ادتا EDTA سدیم تشکیل شده است.
طرز تهیه بافر TAE
غلظت کاری بافر TBE 1X یا 0.5X است. رقت 1 به 10 از بافر TBE 10X با استفاده از آب دیونیزه dH2O محلول کاری 1X ایجاد میکند که حاوی: 89 میلی مولار تریس (هیدروکسی متیل) آمینو متان، 20 میلی مولار استیک اسید و 2 میلی مولار با pH مساوی 8.00 ± 0.1 است.
نکات برجسته بافر TAE چیست؟
- سازگار با ژلهای آگارز افقی و پلی آکریل آمید عمودی
- با DNA دناتوره و دناتوره شده و RNA غیردناتوره استفاده میشود
- برخلاف بافر TBE، با فعالیت برخی از آنزیم های پایین دستی مانند لیگازها تداخلی ندارد.
- غیر استریل؛ فیتر شده با غشاء 2 میکرومتر
کاربرد
- رانینگ بافر (بافر الکتروفورز) الکتروفورز اسید نوکلئیک برای آگارز و ژل پلی آکریل آمید
- تهیه ژل آگارز و پلی آکریل آمید
- تجزیهوتحلیل RNA نیتیو و دناتوره کننده
- بافر انتقال در نورترن بلاتینگ
دمای نگهداری
دمای اتاق
قیمت خرید بافر TAE 50X – تهیه بافر TAE 50X
0رای کاربران