نقد و بررسی
بروموفنول بلو
توضیحات کلی بروموفنول بلو
از بروموفنول بلو ( BPB یا 3,3′,5,5′- تترا بروموفنول سولفون فتالئین) بهعنوان نشانگر pH، نشانگر رنگ الکتروفورتیک و رنگ استفاده میشود. میتوان آن را با افزودن آرام برمومین به محلول داغ فنل سولفون فتالئین در استیک اسید گلاسیال تهیه کرد. بهعنوان یک شاخص اسید-باز، دامنه کاربردی آن بین pH 3 و 4.6 قرار دارد. از زرد در 3= pH به آبی در 4.6= pH تغییر میکند. این واکنش برگشتپذیر است. بروموفنول بلو از نظر ساختاری مرتبط به فنل فتالئین است.
از بروموفنول بهعنوان نشانگر رنگی برای نظارت بر روند الکتروفورز ژل آگارز و الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید استفاده میشود. ازآنجاکه بروموفنول بار منفی کمی را در pH متوسط حمل میکند، در همان جهت DNA یا پروتئین در ژل مهاجرت میکند.
میزان مهاجرت آن با توجه به تراکم ژل و ترکیب بافر متفاوت است اما در یک ژل آگارز معمولی 1% در بافر TAE 1X یا بافTBE ، بروموفنول بلو با همان سرعت قطعه DNA حدود 300 جفت باز مهاجرت میکند، در 2% آگارز به عنوان قطعه DNA حدود 150 جفت باز مهاجرت میکند. بروموفنول بلو تقریباً با همان سرعت DNA 300-500 جفت باز در ژل آگارز و در قسمت مقابل بافر ژل پلی آکریل آمید پروتئین مهاجرت میکند.
از بروموفنول به عنوان رنگ نیز استفاده میشود. در pH خنثی، رنگ نور قرمز را به شدت جذب میکند و نور آبی را منتقل میکند. (حداکثر میزان جذب آن 600 نانومتر درpH خنثی 12 است. بنابراین محلولها رنگ آبی هستند.
در pH کم، رنگ نور ماوربنفش و آبی را به شدت جذب میکند و در محلول به رنگ زرد ظاهر میشود. در محلول با 3.6= pH حاصل از انحلال در آب بدون هیچگونه تنظیم pH، بروموفنول دارای یک رنگ قرمز سبز مشخص است. این پدیده را رنگ دی کروماتیک مینامند.
کاربرد
بروموفنول بلو در موارد زیر استفاده شده است:
- رنگ ردیابی در الکتروفورز ژل آگارزDNA و RNA
- رنگ ردیابی در الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید پروتئین
دمای نگهداری
دمای اتاق
همچنین شما می توانید برای مشاهده محصولات شرکت مرک آلمان همین حالا بر روی لینک مورد نظر کلیک کنید و برای مشاهد محصول در سایت اصلی بر روی اینجا کلیک نمایید .
0رای کاربران