نقد و بررسی
بافر TAE 10X
بافر Tris-EDTA برند ATR-MED
توضیحات کلی
بافر TAE (Tris- Acetate-EDTA) 10X بهطور گستردهای برای جداسازی اسیدهای نوکلئیک در الکتروفورز ژل افقی و گاهی اوقات در ژل پلی آکریل آمید عمودی استفاده میشود. بافر TAE برای وضوح بالای الکتروفورز قطعات اسید نوکلئیک بلند (بیشتر از 1500 جفت باز) روی ژل آگارز مناسب است. ظرفیت بافری کمتری نسبت به بافر TBE دارد. به طور کلی، قطعات اسید نوکلئیک در ژل های دارای بافر TAE کندتر حرکت می کنند به غیر از dsDNA خطی، که تمایل دارد در بافر Tris- Acetate-EDTA سریعتر ران شود. بافر TAE یا تریس-استات-ادتا برای الکتروفورز ژل آگارز قطعات DNA با اندازه متوسط از 300 جفت باز تا 20 کیلوباز قابل استفاده است. بافر Tris- Acetate-EDTA همچنین برای تجزیه و تحلیل RNA نیتیو (غیر دناتوره کننده) و در ژل های دناتوره کننده به جای بافر MOPS با استفاده از نمونه های RNA دناتوره شده در فرمامید داغ استفاده می شود.
تفاوت بافر TAE و TBE
بهطورکلی، تفاوت بافر TBE و TAE در این است که بافر تریس-بورات-ادتا EDTA برای الکتروفورز با ولتاژ بالا (> 150 ولت) مناسبتر است زیرا ظرفیت بافری بالاتر و رسانایی کمتری نسبت به بافر تریس-استات-ادتا دارد.
طرز تهیه بافر تریس TAE
غلظت کاری بافر TBE 1X یا 0.5X است. رقت 1 به 10 از بافر TBE 10X با استفاده از آب دیونیزه dH2O محلول کاری 1X ایجاد میکند که حاوی: 89 میلی مولار تریس (هیدروکسی متیل) آمینو متان، 20 میلی مولار استیک اسید و 2 میلی مولار با pH مساوی 8.00 ± 0.1 است.
نکات برجسته TAE buffer چیست؟
- سازگار با ژلهای آگارز افقی و پلی آکریل آمید عمودی
- با DNA دناتوره و دناتوره شده و RNA غیردناتوره استفاده میشود
- برخلاف بافر TBE، با فعالیت برخی از آنزیم های پایین دستی مانند لیگازها تداخلی ندارد.
- غیر استریل؛ فیتر شده با غشاء 2 میکرومتر
کاربرد بافر تریس TAE 10X
- رانینگ بافر (بافر الکتروفورز) الکتروفورز اسید نوکلئیک برای آگارز و ژل پلی آکریل آمید
- تهیه ژل آگارز و پلی آکریل آمید
- تجزیهوتحلیل RNA نیتیو و دناتوره کننده
- بافر انتقال در نورترن بلاتینگ
دمای نگهداری TAE buffer
دمای اتاق
قیمت بافر TAE 10X برند ATR-MED و یا خرید بافر تریس
تهیه بافر TAE 50x، بافر تانک الکتروفورز، تهیه ژل آگارز برای الکتروفورز
0رای کاربران