کوماسی برلیانت بلو R-250

کوماسی برلیانت بلو R-250

توضیحات کلی

کوماسی برلیانت بلو R-250 (برلیانت بلو) برای تشخیص باندهای پروتئین بعد از الکتروفورز استفاده می‌شود. رنگ برلیانت بلو G-250 (کوماسی بلو G-250) یک رنگ برای آشکارسازی باندهای پروتئین در ژل پلی آکریل آمید–سدیم دودسیل سولفات SDS (SDS-PAGE) است. برلیانت بلو R برای تشخیص باند پروتئینی در الکتروفورز ژل گرادیانت غیردناتوره، ایزوالکتریک فوکوسینگ نیز استفاده می‌شود. مترادف کوماسی برلیانت بلو R-250 (برلیانت بلو) شامل اسید بلو 83، برلیانت بلو R و برلیانت ایندوسیانین 6B است. برلیانت بلو R ه ویژه برای استفاده در رنگ‌آمیزی پروتئین در ژل‌های آگارز به دنبال ایمونوالکتروفورز و ژل Ouchterlony استفاده شده است. رنگ برلیانت بلو R-250 با اتصال به پروتئین‌هایی مثل کلاژن و هیستون دچار کرومازی شده و رنگ صورتی-قرمز را نمایش می‌دهد.

نحوه انتخاب رنگ‌های کوماسی برلیانت بلو R-250 یا کوماسی برلیانت بلو G-250:

پروتئین‌های جداشده توسط ژل الکتروفورز را می‌توان با استفاده از روش‌های مختلف رنگ‌آمیزی، ازجمله تکنیک‌های رنگ‌آمیزی کوماسی برلیانت بلو G-250 و رنگ‌آمیزی نیترات نقره و رنگ‌های فلورسنت مشاهده کرد. در بین این تکنیک‌های رنگ‌آمیزی، رنگ‌آمیزی نقره بدون شک بالاترین حساسیت را ارائه می‌دهد. بااین‌حال، این پروتکل همچنین شامل یک پروتکل پیچیده و نسبتاً وقت‌گیر است، دارای محدوده دینامیکی خطی و تکرارپذیری کم است و با طیف‌سنجی جرمی نیز سازگار نیست. از سوی دیگر، رنگ‌های فلورسنت، حساسیت بالا و محدوده دینامیکی خطی گسترده‌ای را ارائه می‌دهند. همچنین دارای یک پروتکل ساده و درعین‌حال قوی هستند و با طیف‌سنجی جرمی نیز سازگار است. بااین‌حال، رنگ‌های فلورسنت نیز در مقایسه با تکنیک‌های دیگر گران‌تر هستند و برای تصویربرداری نیاز به یک دوربین CCD یا اسکنر فلورسانس دارند. به این دلایل، اکثر محققان به‌جای آن از روش رنگ‌آمیزی کوماسی  Coomassie استفاده می‌کنند.

رنگ‌های کوماسی Coomassie (همچنین به‌عنوان Coomassie Blue یا Coomassie Brilliant Blue نیز شناخته می‌شود) محبوب‌ترین رنگ آنیونی مورد استفاده در مشاهده پروتئین‌ها در ژل‌های SDS-PAGE هستند. درحالی‌که ممکن است به‌اندازه رنگ‌های فلورسنت و نقره حساس نباشند، این رنگ‌ها محدوده دینامیکی خطی نسبتاً خوب و حساسیت متوسط ​​را ارائه می‌دهند. این ویژگی‌ها آن را به پرکاربردترین روش رنگ‌آمیزی برای شناسایی پروتئین و طیف‌سنجی جرمی در آزمایشگاه‌های پروتئین در سراسر جهان تبدیل کرده است.

رنگ‌های کوماسی معمولاً به‌عنوان رنگ‌های پایه برای تشخیص پروتئین در ژل الکتروفورز و معرف‌های سنجش برادفورد برای تعیین مقدار پروتئین استفاده می‌شوند. رنگ‌های کوماسی Coomassie در دو نوع کوماسی برلیانت بلو R-250 یا کوماسی برلیانت بلو G-250 در فروشگاه آنلاین مواد شیمیایی آزمایشگاهی ارائه می‌شوند.

اساساً، آن‌ها دو شکل شیمیایی از یک ترکیب تری فنیل متان دی سولفونه هستند و از نظر ساختاری بسیار مشابه هستند، درحالی‌که  که کوماسی G-250 دارای دو گروه متیل اضافی است. رنگ‌های کوماسی با اتصال به پروتئین‌ها از طریق برهمکنش‌های یونی بین گروه‌های اسید سولفونیک در رنگ و گروه‌های آمین مثبت در پروتئین، و از طریق پیوندهای واندروالس عمل می‌کنند.

کوماسی R-250 و کوماسی G-250 از کدام رنگ باید استفاده کنید؟

اساساً، هر دو R-250 (R نشان‌دهنده ته رنگ مایل به قرمز در رنگ آبی است) و G-250 (G نشان‌دهنده رنگ مایل به سبز در رنگ) حساسیت نسبتاً بالایی دارند و امکان تشخیص آسان را فراهم می‌کنند (این رنگ‌ها پس از اتصال به مولکول‌های پروتئین کمپلکس‌های رنگی ایجاد می‌کنند. همچنین رنگ‌پذیری برگشت‌پذیر را در شرایط مناسب فراهم می‌کنند. اگرچه هر دورنگ کوماسی R-250 و کوماسی G-250 اساساً ساختار شیمیایی یکسانی دارند، اما R-250 و G-250 به روش‌های فیزیکی و رنگ‌آمیزی متفاوت نیاز دارند و در هیچ پروتکل خاصی قابل تعویض نیستند. رنگ‌ها به‌طور یکسان به همه پروتئین‌ها متصل نمی‌شوند و از نظر شیمیایی با پروتئین‌ها واکنش نمی‌دهند، بلکه صرفاً کمپلکس‌های غیر کووالانسی را تشکیل می‌دهند.

بین این دو، Coomassie Brilliant Blue R-250رایج‌ترین رنگ نوع مورد استفاده برای تشخیص پروتئین است زیرا می‌توان از آن برای شناسایی مقدار کمتر از 0.1 میکروگرم پروتئین استفاده کرد. هنگام استفاده از تکنیک رنگ‌آمیزی کلاسیک، ژل‌های پروتئینی با محلول رنگ‌آمیزی Coomassie انکوبه می‌شوند و سپس با استفاده از محلول اسید استیک رنگ‌بری می‌شوند تا امکان مشاهده باندهای پروتئینی فراهم شود. این تکنیک نسبتاً ارزان شامل یک پروتکل ساده است و با طیف‌سنجی جرمی نیز سازگار است، اما تکرارپذیری پایینی دارد و ممکن است مشاهده پروتئین‌های با مقادیر فراوانی کم را دشوار کند.

مانند R-250، Coomassie G-250 (همچنین به‌عنوان رنگ Coomassie کلوئیدی شناخته می‌شود) نیز حساسیت نسبتاً بالایی با حساسیت 50-100 نانوگرم/باند را ارائه می‌دهد و شامل یک پروتکل ساده است. بااین‌حال، G-250 پروتکل رنگ‌آمیزی سریع‌تری را ارائه می‌کند و نیاز به رنگ‌زدایی ژل را از بین می‌برد (به‌راحتی می‌توانید باندهای پروتئینی را در پس‌زمینه کهربایی روشن مشاهده کنید). علاوه بر این، کوماسی G-250 می‌تواند برای تعیین کمی مقدار پروتئین در محلول (آزمایش برادفورد) استفاده شود. پس از اتصال به پروتئین، رنگ (که در شرایط اسیدی رنگ قهوه‌ای دارد) رنگ مایل به آبی ایجاد می‌کند. جذب نوری محلول در طول‌موج 595 نانومتر اندازه‌گیری می‌شود و سپس از داده‌های حاصل می‌توان برای تعیین غلظت پروتئین و مقدار واقعی پروتئین در یک محلول استفاده کرد. کوماسی برلیانت بلو G-250 با افزودن دو گروه متیل و رنگ کمی مایل به سبز تا رنگ آبی خود از کوماسی برلیانت بلو R-250 متمایز می‌شود. برلیانت بلو G-250 ممکن است به یکی از سه شکل وجود داشته باشد: کاتیون (فرم قرمز) در pH زیر 0 با پیک جذب در 470 نانومتر، آنیون (فرم آبی) در pH بالاتر از 2 با پیک جذب در 595 نانومتر و خنثی، به شکل سبز در pH حدود 1 با پیک جذب در حدود 650 نانومتر ایجاد می‌شود. شکل آنیونی آبی، آن چیزی است که با بقایای اسیدهای آمینه مانند آرژنین یا آروماتیک پیوند برقرار ایجاد کرده و یک مجموعه پایدار را تشکیل می‌دهد که اساس روش برادفورد است. روش برادفورد از ویژگی‌های طیفی Coomassie Brilliant Blue G-250 برای تخمین میزان پروتئین در یک محلول استفاده می‌کند. یک نمونه پروتئین به محلول رنگ کوماسی برلیانت بلو G-250 در اسید فسفریک و اتانول اضافه می‌شود. در شرایط اسیدی رنگ به‌طورمعمول قهوه‌ای‌رنگ است اما با اتصال به پروتئین، شکل آبی‌رنگ تولید می‌شود. جذب نوری محلول در طول‌موج 595 نانومتر اندازه‌گیری می‌شود. این رنگ به دلیل حساسیت بالا قادر به شناسایی 5 میکروگرم پروتئین است. با اتصال به یک پروتئین، مولکول رنگ Coomassie Brilliant Blue G-250 با بار منفی، بار منفی به کل پروتئین می‌دهد. از این ویژگی می‌توان برای جداسازی پروتئین‌ها یا کمپلکس‌های پروتئینی با استفاده از الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید تحت شرایط غیر دناتوراسیون در روشی به نام Blue Native PAGE استفاده کرد.

کاربرد کوماسی برلیانت بلو R-250

• برای تشخیص باند پروتئین پس از در الکتروفورز ژل سدیم دودسیل سولفات-پلی آکریل آمید (SDS-PAGE)
• الکتروفورز ژل گرادیانت غیردناتوره، ایزوالکتریک فوکوسینگ
• رنگ برلیانت بلو R-250 با اتصال به پروتئین‌هایی مثل کلاژن و هیستون دچار کرومازی شده و رنگ صورتی-قرمز را نمایش می‌دهد
• در رنگ‌آمیزی پروتئین در ژل‌های آگارز به دنبال ایمونوالکتروفورز و ژل Ouchterlony

دمای نگه‌داری

دمای اتاق

• شرکت آرکا طب روهام مسایل مربوط به : بریلیانت بلو خرید Coomassie Blue R-250 Brilliant Blue R-250 Coomassie Blue ،خرید کوماسی برلیانت بلو، فروش کوماسی بلو، قیمت Coomassie Blue R-250، قیمت کوماسی برلیانت بلو، قیمت کوماسی بلو، کوماسی برلیانت بلو، کوماسی برلیانت بلو آر 250، کوماسی بریلیانت بلو، کوماسی بریلینت بلو ،کوماسی بلو R-250 را با مشتریان در میان می گذارد.

خرید کوماسی بلو

شما می‌توانید قیمت آنلاین کوماسی R-250 و  G-250 و همچنین قیمت آنلاین برلیانت بلو R-250 و G-250 را در فروشگاه ATR-MED، ملاحظه نموده و اقدام به خرید اینترنتی کوماسی R-250 و  G-250، برلیانت بلو R-250 و G-250 نمایید.

همین حالا می توانید پیج اینستا گرام ما را فالو نمایید و از جدیدترین محصولات ما آشنا شده و از تخفیفات ما بهره مند شوید: