نقد و بررسی
کوماسی برلیانت بلو G-250 (شرکت سیگماآلدریچ)
- خالص
- نام انگلیسی محصول: Brilliant Blue G
- مترادف: Acid blue 90, Coomassie Brilliant Blue G
توضیحات کلی :
برلیانت بلو G-250 (کوماسی بلو) برای تشخیص باندهای پروتئین بعد از الکتروفورز استفاده میشود. رنگ برلیانت بلو G-250 (کوماسی بلو G-250) یک رنگ حساس برای آشکارسازی باندهای پروتئین در ژل پلی آکریل آمید (SDS-PAGE) است و باندهای آبی رنگ در زمینه شفاف با حساسیت 50-100 نانوگرم/باند ایجاد میشود. این رنگ بهعنوان رنگ قابل حل در آب در الکتروفورز ژل SDS-پلی آکریل آمید (SDS-PAGE) و آزمون برادفورد شناخته میشود.
با ترکیب رنگ برلیانت بلو R-250 (کوماسی بلو) با رنگ نقره میتوان بین انواع مختلف پروتئین تمایز قائل شد. رنگ برلیانت بلو R-250 با اتصال به پروتئینهایی مثل کلاژن و هیستون دچار کرومازی شده و رنگ صورتی-قرمز را نمایش میدهد.
کوماسی G-250 عضوی از خانواده رنگهای تری فنیل متان در خانواده Coomassie است و بهعنوان رنگ تحلیلی رایج در SDS-PAGE استفاده میشود. کوماسی برلیانت بلو G-250 همچنین میتواند با روش برادفورد برای تعیین غلظت پروتئین استفاده شود. کوماسی G-250 با افزودن دو گروه متیل و رنگ کمی مایل به سبز تا رنگ آبی خود از کوماسی برلیانت بلو R-250 متمایز میشود.
برلیانت بلو G-250 ممکن است به یکی از سه شکل وجود داشته باشد: کاتیون (فرم قرمز) در pH زیر 0 با یپک جذب در 470 نانومتر، آنیون (فرم آبی) در pH بالاتر از 2 با پیک جذب در 595 نانومتر و خنثی، به شکل سبز در pH حدود 1 با پیک جذب در حدود 650 نانومتر ایجاد میشود. شکل آنیونی آبی، آن چیزی است که با بقایای اسیدهای آمینه مانند آرژنین یا آروماتیک پیوند برقرار ایجاد کرده و یک مجموعه پایدار را تشکیل میدهد که اساس روش برادفورد است.
روش برادفورد از ویژگیهای طیفی Coomassie Brilliant Blue G-250 برای تخمین میزان پروتئین در یک محلول استفاده میکند. یک نمونه پروتئین به محلول رنگ کوماسی برلیانت بلو G-250 در اسید فسفریک و اتانول اضافه میشود. در شرایط اسیدی رنگ به طور معمول قهوهای رنگ است اما با اتصال به پروتئین، شکل آبی رنگ تولید میشود. جذب نوری محلول در طول موج 595 نانومتر اندازهگیری میشود.
این رنگ به دلیل حساسیت بالا قادر به شناسایی 5 میکروگرم پروتئین است. با اتصال به یک پروتئین، مولکول رنگ Coomassie Brilliant Blue G-250 با بار منفی، بار منفی به کل پروتئین میدهد. از این ویژگی میتوان برای جداسازی پروتئینها یا کمپلکسهای پروتئینی با استفاده از الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید تحت شرایط غیر دناتوراسیون در روشی به نام Blue Native PAGE استفاده کرد.
کاربرد:
کوماسی برلیانت بلو G-250 در موارد زیر استفاده شده است:
- برای تشخیص باند پروتئین پس از در الکتروفورز ژل سدیم دودسیل سولفات-پلی آکریل آمید (SDS-PAGE)
- برلیانت بلو G-250 (کوماسی بلو) برای تعیین غلظت پروتئین ادرار استفاده شده است.
- بهعنوان آنتاگونیست P2X7R (گیرنده پورینرژیک) استفاده شده است. گیرنده عمدتاً در التهاب عصب نقش دارد. در موش اسکلروز لترال آمیوتروفیک SOD1G93A انسانی، استفاده از کوماسی برلیانت باعث کاهش وزن میشود. بااینحال، بر بقا یا هماهنگی حرکتی در موشهای تراریخته تأثیری نمیگذارد.
دمای نگهداری :
دمای اتاق
همچنین شما می توانید برای مشاهده محصولات بیولوژی مولکولی همین حالا بر روی لینک مورد نظر کلیک کنید و برای مشاهد محصول در سایت اصلی بر روی اینجا کلیک نمایید .
0دیدگاه کاربران