کیت الایزا، یک آزمایش ایمونووژیکی استاندارد و نسبتا دقیقی می باشد. سنجش آنزیم مرتبط سیستم ایمنی با نام اختصاری ELISA شناخته می‌شود و در دهه ۱۹۷۰ بوجود آمده است. این تست آزمایشگاهی متداول، متمرکز بر( analyte) است که عموما پادتن ها و آنتی ژن‌ها در یک محلول خاص را اندازه گیری می‌کند.
با ELISA نتیجه کمی ای می‌تواند کشف شود که از سایر تست های مشابه جدا می‌شود.فرآیند پایه برای تست با کیت الایزا با مرحله پوششی آغاز می‌شود. در این مرحله یک پلیت پلی استایرن با یک محلول که یا پادتن و یا آنتی ژن است پوشانده می‌شود.
سپس مایع ریخته و پلیت شسته می‌شود و مرحله بعد مسدود کردن است. در این مرحله یک محلول پروتئین محور و نامرتبط به محلول اول، طرف های بدون مرز روی پلیت را می‌پوشاند.
یکبار دیگر، مایع برداشته و پلیت شسته می‌شود. در مرحله کشف آنتی ژن یا پادتن آنزیم مزدوج به آنتی ژن یا پادتن هدف متصل می‌شود . پلیت سپس خشک و شسته شده و سرانجام یک ماده در پلیت قرار میش گیرد و سیگنال بواسطه واکنش آنزیم و ماده ای که اندازه گیری شده، داده می‌شود.
بیشتر بخوانید : با انواع ظروف آزمایشگاهی آشنا شوید
کیت الایزا دارای ماده هایی هستند، که برای انجام دادن تست الیزا توسط محققان یا کارشناسان آزمایشگاه های تشخیصی و تحقیقاتی استفاده می شود،پایه و اساس بر موجودیت آنتی ژن و آنتی بادی در نمونه می باشد ،در حالت کلی این تست برای ردیابی آنتی ژن یا آنتی بادی به کار می رود به این صورت که یکی از این 2 ماده در بستر جامد ثابت می شود و برای رد یابی دومی مورد استفاده قرار می گیرد
آزمایش الایزا (ELISA) بر اساس چگونگی پیوند و استفاده از آنالیت ها و آنتی بادی ها به چندین نوع روش تقسیم می شود.
سریع ترین روش است و مراحل کمتری دارد (6 مرحله). همچنین مستعد خطای کمتری می باشد.
الایزای مستقیم دارای دو روش الايزاي مستقيم براساس جذب يا پوشش‌دهي آنتي‌ژن و الايزاي مستقيم براساس جذب يا پوشش‌دهي آنتي‌بادي می باشد.
بیشتر بخوانید :تحقیق و توسعه در زمینه تولید انواع آنتی بادی های پلی کلونال و مونوکلونال
در این روش آنتی ژن هدف یا آنتی بادی هدف در نمونه ای که باید تشخیص داده شود به طور مستقیم بر سطح فاز جامد (چاهک های میکروپلاته) کوت می شود.
شستشو انجام می گیرد و یک آنتی بادی متصل به آنزیم یا یک آنتی ژن اختصاصی آنتی بادی هدف اضافه شده و انکوبه می گردد. پس از شستشو، سیگنالی متناسب با مقدار آنتی ژن موجود در نمونه تولید می شود و فعالیت آنزیم ریزپلاته خوب با الایزاریدر اندازه گیری می شود.
الایزا غیرمستقیم براي مشخص نمودن آنتي‌بادي اختصاصی عليه يك پاتوژن خاص يا تیتراسیون آنتی بادی در نمونه های سرم مورد استفاده قرار می گیرد و 8 مرحله دارد.
در این روش آنتی ژن بر روی سطح چاهک های میکروپلاته کوت می شود (آنتی ژن کوت شده آنتی ژن اختصاصی مربوط به آنتی بادی است که قرار است در نمونه رديابی شود). شستشو انجام می گیرد و آنتی بادی اولیه (عليه آنتي‌ژن پوشش داده شده) اضافه شده و انکوبه می شود.
بیشتر بخوانید : محیط کشت میکروبی چیست؟
به دنبال آن یک آنتی بادی ثانویه در برابر آنتی بادی اولیه قرار می گیرد و باز هم انکوباسیون می شود. این آنتی بادی ثانویه اغلب یک آنتی بادی ضد پلی کلونال است. پس از شستشو، بواسطه فعالیت آنزیم ریزپلاته خوب با الایزاریدر اندازه گیری می شود.
در الایزا ساندویچ از دو آنتی بادی اختصاصی آنتی ژن برای گرفتن یا “ساندویچ” آنتی ژن در چاهک برای تشخیص استفاده کنید. سنجش های ایمونومتریک ارتباط مستقیمی بین غلظت آنتی ژن و پاسخ سوبسترا دارند.در این روش یک آنتی بادی در سطح چاهک های میکروپلاته کوت می شود و ابتدا آنتی ژن و سپس آنتی بادی اختصاصی آنتی بادی هدف که با آنزیم کونژوگه شده، اضافه می گردد.
انکوباسیون انجام می شود و پس از شستشو، هنگامی که بستر کروموژنیک برای توسعه رنگ به سنجش اضافه می شود، نمونه هایی با غلظت آنتی ژن بالا سیگنال بیشتری را نسبت به آن هایی که غلظت آنتی ژن پایین دارند، تولید می کنند.
آنتی بادی بی حرکت (نارنجی) و آنتی بادی دارای آنزیم (سبز) باید اپی توپ های مختلف آنتی ژن هدف را تشخیص دهند. در نهایت فعالیت آنزیم ریزپلاته خوب با الایزاریدر اندازه گیری می شود.
الایزا ، رقابتی نسبتاً پیچیده است زیرا شامل استفاده از آنتی ژن مهار کننده است.
در الایزا رقابتی اساس سنجش، رقابت بین دو آنتی ژن يا دو آنتی بادی (که يکی از آن دو نشاندار است) برای اتصال به لیگاند با مقدار محدود می باشد.
این تست یکی از حساس ترین تست های ایمنی قابل دسترس امروزی است. حساسیت بستگی به ویژگی های واکنش پادتن- آنتی ژن دارد. به جهت بهبود نتایج آزمایشگاه می‌تواند یک لایه اضافه کند همانند آنهایی که به نورتابی شیمیایی یا سیگنال فلورسنت داده می‌شود.
نتایج یک تست کیت الایزا تحقیقاتی می‌تواند کمی، کیفی و نیمه کیفی باشد. نتایج معمولا جهت مقایسه با سایر نتایج و رسیدن به نتیجه قطعی نموداری می‌شوند.
برای خرید مواد آزمایشگاهی شیمیایی و صنعتی و یا خرید تجهیزات آزمایشگاهی شما میتوانید با مراجعه به فروشگاه شرکت آثل طب از خدمات آزمایشگاهی برخوردار شوید.
فروشگاه ATR-MED، با تشکیل تیمی از نخبگان کشور (عضو بنیاد ملی نخبگان و دارای مقالات علمی متعدد ثبت‌شده در مجلات معتبر) که ارتباط نزدیک علمی با مراکز تحقیقاتی و دانشگاهی اروپا و آمریکایی را دارد، فعالیت خود را به‌طور تخصصی در زمینه فروش آنلاین جامع محصولات علوم زیستی و خدمات آزمایشگاهی ارائه می دهد.
تمامی حقوق این وب سایت در اختیار آثل طب راد مد ایرانیان (ATR-MED) بوده و استفاده از محتوای آن تنها با درج منبع امکان پذیر می باشد.
