نقد و بررسی
مهارکننده آنزیم RNase
توضیحات کلی
مهارکننده آنزیم RNase، فعالیت RNase (انواع RNase A,B,C) را بااتصال غیر کووالانسی در یک حالت غیررقابتی با نسبت 1: 1 مهار میکند. وجود مقدار کمی از آنزیم RNase در طی پروسه استخراج RNA میتواند باعث اختلال در تخلیص شود.
چنین آلودگی میتواند از طریق نوک سر سمپلر، میکروتیوب و سایر وسایل و مواد مورداستفاده، باشد. آنزیم RNase Inhibitor یا آنزیم مهارکننده RNase معمولاً بهعنوان یک اقدام احتیاطی در هنگام کار با RNA برای مهار و کنترل چنین آلودگی استفاده میشود.
این آنزیم از باکتری E. coli مشتق شده است که قسمتهای از مهارکننده ریبونوکلئاز جفت انسانی را بیان میکند. این آنزیم RNases ریبونوکلئاز A ، B و C را مهار میکند و RNases H، 1 ، T1 ، S1 Nuclease ، SP6 ، T7 RNA پلیمراز ، T3 RNA پلیمراز، آنزیم نسخهبردار معکوس AMV (Avian Myeloblastosis Virus Reverse Transcriptase)، آنزیم نسخهبردار معکوس M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase) یا Taq Polymerase را مهار نخواهد کرد مهارکننده آنزیم RNase را میتوان با استخراج فنلی یا با حرارت دادن در دمای 65 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه از بین برد. مهارکننده ریبونوکلئاز یا RNases بهصورت در 20 میلی مولار HEPES-KOH با pH 7.6، 50 میلی مولار KCl ، 8 میلی مولار DTT و 50% گلیسرول ارائه شده است.
کاربرد
آنزیم RNase Inhibitor یا آنزیم مهارکننده RNase در موارد زیر استفاده شده است:
- RNA را از تخریب در دمای 55 درجه سانتیگراد محافظت میکند
- مهار تجزیه RNA در پروسههای:
- رونویسی
- سنتز cDNA
- ترجمه
- جداسازی بخشهای سلول پستانداران که حاوی کمپلکس پروتئین-mRNA است
- تکثیر RNA
- تخلیص و ذخیرهسازی RNA
- جداسازی و شناسایی فعالیتهای ویژه ریبونوکلئاز
- سرکوب تومور
عملکرد بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی
این آنزیم با تشکیل یک کمپلکس محکم و غیر کووالانسی با نسبت 1: 1 RNase را مهار میکند. محدوده pH برای مهار ، 5.5 تا9 است و بالاترین مهار در pH 7-8 صورت میگیرد.
غلظت مورد استفاده 250-1000 واحد در میلیلیتر است. از شرایط دناتوراسیون (بهعنوانمثال اوره یا دمای 50 درجه سانتیگراد) باید اجتناب شود زیرا ممکن است باعث آزاد شدن ریبونوکلئاز فعال از کمپلکس شود.
دمای نگهداری
دمای 20- درجه سانتیگراد
در صورت داشتن هرگونه سوالاتی از قبیل: قیمت آنلاین، فروش و یا خرید اینترنتی مهارکننده آنزیم RNase؛ RNase Inhibitor؛ مهار کننده رقابتی آنزیم؛ انواع بازدارنده های آنزیمی خرید مهارکننده آنزیم RNase،قیمت مهارکننده آنزیم RNase،قیمت Ribonuclease Inhibitor،قیمت مهار کننده ریبونوکلئاز، مهارکننده آنزیم RNase قیمت، RNase Inhibitor و …و یا نیاز به مشاوره علمی، با ما تماس حاصل فرمایید.
همچنین شما می توانید برای مشاهده محصولات بیولوژی مولکولی همین حالا بر روی لینک مورد نظر کلیک کنید و برای مشاهد محصول در سایت اصلی بر روی اینجا کلیک نمایید .
0رای کاربران