نقد و بررسی
نمک سدیم HEPES گرید کشت سلول
توضیحات کلی
نمک سدیم HEPES گرید کشت سلول به یونهای منیزیم، کلسیم ، منگنز (II) یا مس (II) متصل نمیشود. HEPES بهعنوان یکی از بهترین بافرهای همهمنظوره موجود برای تحقیقات حوزه بیولوژی توصیفشده است. نمک سدیم هپس HEPES در بیشتر pH های بیولوژیکی، مولکول زویتریونیک zwitterionic است و بهعنوان یک بافر در pH 6.8 تا 8.2 (pK ±1، بهعنوان یک قاعده کلی) بیشتر مؤثر است. نمک سدیم هپس در طیف گستردهای از روشها، ازجمله کشت سلول و بافت مورد استفاده قرار گرفته است. قدرت بافر نمک سدیم هپس HEPES برای کشت سلولی معمولاً در محدوده 10 تا 25 میلی مولار است. برای حفظ اسمولالیته مناسب در محیط باید مراقبت شود و سمیت نمک سدیم هپس HEPES با توجه به رده سلولی معین باید ارزیابی شود. دادههای ایزوتونیکی جدولبندی شده است.
گزارششده است که HEPES در کنترل pH در بافت و بافت اندام نسبت به سدیم بیکربنات NaHCO3 مؤثرتر است. متأسفانه، HEPES برای برخی از روشهای آنالیز بر پایه پروتئین توصیه نمیشود. نمک سدیم هپس HEPES با سنجش پروتئین FolinCiocalteu تداخل دارد. سنجش پروتئین بیورت استفاده از نمک سدیم هپس HEPES تحت تأثیر قرار نمیگیرد. HEPES بافر انتخابی در روش پرسیپیتاسیون پروتئین در میکروسکوپ الکترونی بود زیرا روی لایههای فلزی تأثیر نمیگذارد. نشان داده شد که نمک سدیم هپس HEPES برای استفاده با آمفولین ها در ایجاد شیب pH کمتر از 1 واحد pH برای کاربردهای ایزوالکتریک فوکوسینگ بسیار مناسب است. مترداف نمک سدیم هپس HEPES شامل 4-(2-هیدروکسی اتیل) -1-پیپرازین اتیل سولفونیک اسید سدیم سالت و N-(2-هیدروکسی اتیل) پیپرازین-N ′-(2-اتان سولفونیک اسید) سدیم سالت است.
غلظتهای همولار HEPES و سدیم HEPES را میتوان در حجمهای تقریباً مساوی مخلوط کرد و هر یک از محلولها به pH مناسب تیتر کرد. با تیتراسیون نمک سدیم هپس HEPES با اسید هیدروکلریدریک یک محلول بافر حاوی نصف معادل سدیم کلرید حاصل میشود. این قدرت یونی اضافی، اسمولالیته محلول را به میزان قابلتوجهی تغییر میدهد. محلول بافر HEPES را میتوان با روشهای مختلفی تهیه کرد. اسید آزاد را میتوان به آب اضافه کرد، سپس با تقریباً نیم مول معادل سدیم هیدروکسید یا پتاسیم هیدروکسید به pH دقیق موردنظر، با تنظیمات درجه حرارت و حجم نهایی، تیتر کرد.
کاربرد
نمک سدیم هپس HEPES گرید کشت سلول در موارد زیر استفاده شده است:
- در محیطهای کشت سلولی
- فرمولاسیون دارویی (بالادست و پاییندست)
- فرمولاسیون معرفهای تشخیصی
- بهعنوان بافر در سنجش فسفوریلاسیون در فیبروبلاست های نفوذپذیر
- ممکن است برای آمادهسازی یک بافر پیچیده دیالیز استفاده شود که در تعیین تیروکسین آزاد در سرم با روش رادیوایمونوسی مورد استفاده قرار میگیرد.
عملکرد بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی
نمک سدیم هپس HEPES یک بافر بیولوژیکی است که اغلب بافر “Good′s” نامیده میشود. نمک سدیم هپس HEPES، همراه با HEPES فری اسید استفاده میشود، ازآنجاییکه pKa بافر 7.31 است که با pH فیزیولوژیکی 7.36 مطابقت دارد. HEPES سدیم برای ردههای سلولی غیر توکسیک در نظر گرفته میشود، بسیار محلول در آب است.
دمای نگهداری
دمای اتاق
0رای کاربران