ONPG

ONPG

توضیحات کلی

ONPG یک سوبسترای کالرمتریمک برای β-گالاکتوزیداز است. سوبسترا β-گالاکتوزیداز برای کاربردهای رنگ سنجی، تست EIA و به‌عنوان همتای سوبسترای pNPP الکالین فسفاتاز به‌طور گسترده مورداستفاده قرار می‌گیرد. o-Nitrophenol به‌عنوان محصول نهایی تولید می‌شود و در 405 نانومتر خوانش می‌شود.

2-نیتروفنیل β-D-گالاکتوپیرانوسید یک سوبسترای آنزیمی است که برای تشخیص فعالیت lacZ و درنتیجه وجود β-گالاکتوزیداز استفاده می‌شود.

بتا گالاکتوزیداز، لاکتوز را به گالاکتوز و گلوکز تجزیه می‌کند. β-گالاکتوزیداز مخصوص لاکتوز نیست و می‌تواند روی گالاکتوزیدهای ساده اثر کند. هیدرولیز 2-نیتروفنیل β-D-گالاکتوپیرانوسید منجر به آزاد شدن گالاکتوز و یک ترکیب کروموژنیک زرد می‌شود. سوبسترا آزمایش برای ورود به سلول به آنزیم پرمئاز القایی یا سازنده وابسته نیست، بنابراین واکنش‌ها سریع هستند و در یک دوره 24 ساعته رخ می‌دهند.

تست Onpg برای چیست؟

آزمایش ONPG برای تشخیص آنزیم β-گالاکتوزیداز موجود در تخمیرکننده‌های دیررس لاکتوز استفاده می‌شود تمایز کردن تخمیرکننده‌های دیررس لاکتوز از تخمیرکننده‌های غیر لاکتوزی بسیار دشوار است، زیرا هر دو به شکل کلونی‌های بی‌رنگ در مک کانکی آگار ظاهر می‌شوند.

چه ارگانیسم‌هایی ONPG مثبت هستند؟

آزمایش تخمیر لاکتوز 5 درصد به‌طور موازی زمانی پیشنهاد می‌شود که آزمایش O.N.P.G. برای جداسازی پاتوژن‌های روتین استفاده می‌شود، زیرا ارگانیسم‌هایی مانند شیگلا سونئی، شیگلا دیسانتری 1 و پاستورلا پسودوتبرکلوزیس O.N.P.G مثبت هستند.

آیا E. coli ONPG منفی است؟

تخمیرکننده‌های لاکتوز (O.N.P.G مثبت) اشرشیا کلی، گونه‌های کلبسیلا، گونه‌های انتروباکتر، بتا گالاکتوزیداز و پرمئاز تولید می‌کنند. تخمیرکننده‌های دیررس لاکتوز (ONPG مثبت): گونه‌های سیتروباکتر، گونه‌های آریزونا فقط بتا-گالاکتوزیداز تولید می‌کنند، بنابراین آن‌ها به‌آرامی لاکتوز را تخمیر می‌کنند.

چرا ONPG زرد می‌شود؟

ONPG آنالوگ لاکتوز است که آنزیم می‌تواند آن را تجزیه کند و محصول نهایی زردرنگی به نام O-nitrophenol تولید کند. ازآنجایی‌که این آنزیم فقط در حضور سوبسترای لاکتوز ساخته می‌شود، باید مطمئن شوید که این ارگانیسم را روی محیط‌های حاوی لاکتوز (مثلاً از براث لاکتوز یا TSIA آگار) رشد دهید.

 اپرون لاک چیست؟

O-nitrophenyl ß-galactoside آنالوگ دیگری از لاکتوز است. می‌توان از آن برای اندازه‌گیری کمی فعالیت آنزیم ß-گالاکتوزیداز استفاده کرد. این محصول یک سوبسترا بی‌رنگ است که می‌تواند توسط آنزیم ß-گالاکتوزیداز برای تولید مقادیر استوکیومتری O-nitrophenol زرد و گالاکتوز بی‌رنگ شکسته و برش داده شود.

انحلال‌پذیری

محلول استوک را می‌توان در آب گرید بیولوژی مولکولی با غلظت 3 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر تهیه کرد. روش جایگزین، یک محلول استوک تقریباً 20.5 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر در بافر 100 میلی مولار فسفات سدیم (PH 7.3) تهیه می‌شود. ممکن است برای حل کردن کامل محصول به گرم کردن ملایم نیاز باشد.

سوبستراها

سوبسترای کروموژنیک برای β-گالاکتوزیداز

کاربرد ONPG

ONPG در موارد زیر استفاده می‌شود:

سوبسترادβ-گالاکتوزیداز برای کاربردهای رنگ سنجی و تست EIA

همتای سوبسترای pNPP الکالین فسفاتاز به‌طور گسترده مورداستفاده قرار می‌گیرد

2-نیتروفنیل β-D-گالاکتوپیرانوسید یک سوبسترای آنزیمی است که برای تشخیص فعالیت lacZ و درنتیجه وجود β-گالاکتوزیداز استفاده می‌شود.

آزمایش ONPG برای تشخیص آنزیم β-گالاکتوزیداز موجود در تخمیرکننده‌های دیررس لاکتوز استفاده می شود.

دمای نگه‌داری

دمای 20- درجه سانتی گراد

قیمت و خرید ONPG

شما می‌توانید قیمت آنلاین ONPG را در بزرگترین فروشگاه مواد شیمیایی و آزمایشگاهی ملاحضه نموده و جهت خرید ONPG به صورت اینترنتی اقدام فرمائید.

اینستاگرام موادشیمیایی آزمایشگاهی فروشگاه آثل طب(ATR-MED) را فالو کنید و از محصولات و تخفیف های ما مطلع شوید. همچنین می توانید برای خرید محصولات مورد نظر خود از اینستاگرام اقدام نمایید.