نقد و بررسی
هیگرومایسین B گرید کشت سلول
توضیحات کلی
هیگرومایسین B یک آنتیبیوتیک آمینوگلیکوزید از Streptomyces hygroscopicus است. آمینوگلیکوزیدها پرکاربردترین دسته از آنتیبیوتیکها هستند که ریبوزوم را هدف قرار میدهند. هیگرومایسین B یک آنتیبیوتیک آمینوسیکلیتول است. باکتری Streptomyces hygroscopicus حاوی فعالیت فسفوترانسفراز (HPH) است، که فسفوریله هیگرومایسین B را به خودایمنی در برابر اثرات توکسیک دارو کمک میکند. هیگرومایسین B مانع سنتز پروتئین در پروکاریوتها و یوکاریوتها میشود. از آن برای انتخاب و نگهداری فنوتیپ سلولهای یوکاریوتی که بهطور پایدار با ژن مقاوم به هیگرومایسین E. coli (hyg یا hph) ترنسفکت میشوند، استفاده میشود
کاربرد:
آنتیبیوتیک هیگرومایسین B یا Hygromycin B در موارد زیر استفاده شده است:
- آنتیبیوتیک Hygromycin B برای مقاومت در برابر هیگرو در سلولهای زیر استفاده شد:
- آنتیبیوتیک هیگرومایسین B با غلظت 160 میکروگرم بر میلیلیتر در سلولهای 293T ترنسفکت شده با مخلوط پلاسمیدها
- سلولهای MCF-7ALOX12 با آنتیبیوتیک Hygromycin B در غلظت 150 میکروگرم بر میلیلیتر.
- پلاسمید MSCV لوسیفراز PGK-hygro.
- رده سلولی پایدار گزارشگر STAT3 (بهطور پایدار با ژن لوسیفراز تحت کنترل پروموتر STAT3 ترنسفکت میشوند) در محیط کشت سلولی DMEM با 10٪ سرم جنین گاوی FBS
عملکرد بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی
هیگرومایسین B یا Hygromycin B یک آنتیبیوتیک آمینوگلیکوزیدی است که از Streptomyces hygroscopicus جدا شده است. از آنتیبیوتیک این ماده برای مطالعه سنتز پروتئین در سطح ترانسلکاسیون ریبوزوم S70 و غلط خواندن قالب mRNA، بهعنوان یک عامل ضدویروسی با نفوذ انتخابی به سلولها که توسط عفونت ویروس نفوذپذیر شده و مانع ترجمه mRNA میشوند، و بهعنوان یک عامل انتخابی برای ژنهای مقاوم در برابر هیگرومایسین استفاده شده است.
استفاده از این ماده بهعنوان عامل انتخابی در غلظت 100-800 میکروگرم بر میلیلیتر، بهطور اختصاصی در میکروگرم بر میلیلیتر برای پروکاریوتها، در غلظت 200 میکروگرم بر میلیلیتر در یوکاریوتهای پاییندست و در غلظت 150-400 میکروگرم بر میلیلیتر در یوکاریوتهای بالاتر توصیه میشود. هیگرومایسین B یا Hygromycin B با مهار سنتز پروتئین با القاء نادرست خواندن قالب mRNA و مهار ترجمه در پروکاریوت، عمل میکند.
طیف ضد میکروبی: هیگرومایسین B در برابر باکتریها، قارچها و سلولهای یوکاریوتی نشان داده شده است. مقاومت در برابر این ماده با ژن کد کننده فسفوترانسفراز که این ماده را فسفریله میکند، درنتیجه غیرفعال میشود.
Hygromycin B در موتاسیون یا برای انتخاب بیان ژن و سازههای مکمل در کمپيلوباکتر ژژوني C. jejuni استفاده میشود. همچنین در رویکردهای دیگر برای دستکاری، معرفی یا حذف DNA در C. elegans بهعنوان نشانگر مورد استفاده قرار میگیرد. میتوان هیگرومایسین B یرا توسط آمینوگلیکوزید 4-فسفوترانسفراز-Ia/هیگرومایسین B فسفوترانسفراز (Hph) از طریق فسفوریلاسیون غیرفعال کرد. عملکرد آمینه این آنتیبیوتیک ممکن است در کاتالیز اسید و باز عمومی که توسط ریبوزیم انجام میشود، دخیل باشد و بهعنوان پذیرنده/اهداکننده پروتون عمل میکند.
Hygromycin B، که همچنین Hydrovetine و D-streptamine نامیده میشود ، یک آنتیبیوتیک آمینوگلیکوزیدی است که بهطور طبیعی توسط Streptomyces hygroscopicus تولید میشود و همچنین فعالیت ضد کرم را نشان میدهد. نشان داده شده است که این ماده بهطور مؤثری انتقال mRNA و tRNA بر روی ریبوزوم را در باکتریها و یوکاریوتها مهار میکند و میل ترکیبی tRNA آمینوآسیل (tRNA A-site) را کمی افزایش میدهد. هيگرومايسين B مطابق با اثر اختصاصی آن بر جابجايي، مانع تك فاز سنتز پلي پپتيدها را نشان میدهد و نشان میدهد كه این ماده به يك محل واحد در ريبوزوم متصل میشود.
دمای نگهداری
دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد
0رای کاربران