نقد و بررسی
رنگ DAPI
توضیحات کلی رنگ DAPI
رنگ DAPI یا 4′، 6-دی آمیدینو-2-فنیلیندول، یک رنگ فلورسنت است که بهشدت به مناطق غنی از آدنین-تیمین در DNA متصل میشود. در میکروسکوپ فلورسانس بسیار استفاده میشود. ازآنجاکه رنگ DAPI میتواند از طریق یک غشای سلولی دستنخورده عبور کند، میتوان از آن برای رنگآمیزی سلولهای زنده و فیکس شده استفاده کرد. اگرچه در سلولهای زنده با کارایی کمتری از غشا عبور میکند و بنابراین یک نشانگر برای یکپارچگی غشا میتواند مطرح باشد. غلظت رنگ DAPI مورد نیاز برای رنگآمیزی سلول زنده معمولاً بسیار زیاد است. این ماده در MSDS خود دارای برچسب غیر توکسیک است و اگرچه در باکتری E. coliموتاژن نبوده اما ازآنجاکه یک ترکیب کوچک اتصال شونده به DNA است، احتمالاً دارای برخی اثرات کارسینوژنیک است.
DAPI چندین برابر حساستر از اتیدیوم بروماید بوده و برای رنگآمیزی DNA در ژلهای آگارز استفاده میشود. پودر رنگ DAPI دی هیدروکلرید ممکن است برای انگشتنگاری DNA، شناسایی پروبهای اختصاصی متصل شده در آزمایشهای بلاتینگ و مطالعه تغییرات DNA و آنالیز محتوای DNA در طی آپوپتوز با استفاده از فلوسیتومتری است. همچنین نشان داده شده است که رنگآمیزی DAPI یک روش تشخیص حساس و اختصاصی برای مایکوپلاسما است.
حداکثر جذب رنگ DAPI در هنگام اتصال به DNA دو رشته ای 358 نانومتر و حداکثر انتشار آن 461 نانومتر است. اگرچه شدت فلورسنت DAPI در هنگام اتصال به RNA به اندازه اتصال به DNA و انتشار آن را به حدود 500 نانومتر است.
شما می توانید انواع مواد آزمایشگاهی را در فروشگاه ATR-MED مشاهده نمایید . همچنین شما می توانید این محصول را در سیگما آلدریچ مشاهده نمایید .
کاربرد
- رنگآمیزی DNA در ژلهای آگارز با استفاده از DAPI
- آنالیز تغییرات DNA در حین آپوپتوز
- تشخیص مایکوپلاسما
- انگشتنگاری DNA
- رنگآمیزی ایمونوفلورسانس سلول
- مانیتورینگ سریع آلودگی میکروبی
- در روش باندینگ کروموزومی
- در تشخیص سلولهای آپوپتوتیک
- در میکروسکوپ فلورسانس برای ردیابی حرکت DisA (پروتئین اسکنینگ یکپارچگی DNA) بر روی DNA باسیلوس سوبتیلیس
عملکرد بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی
به شیار مینور DNA دو رشتهای (ترجیحاً به DNA غنی از AT) متصل میشود و یک مجموعه پایدار را تشکیل میدهد که تقریباً فلورسانس آن 20 برابر بیشتر از DAPI تنها است.
دمای نگهداری
دمای 2-8 درجه سانتیگراد
0رای کاربران