پودر تریپسین گرید کشت سلولTrypsin from porcine pancreas
پودر تریپسین
0 (0)

0دیدگاه کاربران

شناسه محصول: T4799 (9002-07-7) دسته:

در انبار موجود نمی باشد

پودر تریپسین گرید کشت سلولTrypsin from porcine pancreas

0 (0)

0دیدگاه کاربران

شناسه محصول: T4799 (9002-07-7) دسته:
صاف
ویژگی های محصول
  • برند : سیگماآلدریچ
  • CAS نامبر : 7-07-9002
  • Catalogue نامبر : T4799
  • مترادف: -
  • دمای نگهداری : دمای 20- درجه سانتی‌گراد
  • + موارد بیشتر - بستن
  • فروش توسط فروشگاه ATR-MED
  • با ضمانت ATR-MED
  • ارسال از انبار ATR-MED
  • بسته بندی توسط ATR-MED

۷۵۰,۰۰۰ تومان تا ۲,۸۰۰,۰۰۰ تومان

محصولات مرتبط

نقد و بررسی

پودر تریپسین گرید کشت سلول

پودر تریپسین به دلیل عملکرد و تولرانس موثر نسبت به سلول‌های مختلف و ﻧﻮﺗﺮاﻟﻴﺰاﺳﻴﻮن القایی سرم، در دایجستشن بافت و جداسازی سلول‌های چسبنده از سطح فلاسک کشت کاربرد دارد…

توضیحات کلی پودر تریپسین

پودر تریپسین به دلیل عملکرد و تولرانس موثر نسبت به سلول‌های مختلف و ﻧﻮﺗﺮاﻟﻴﺰاﺳﻴﻮن القایی سرم، در دایجستشن بافت و جداسازی سلول‌های چسبنده از سطح فلاسک کشت کاربرد دارد.

مطالعه کنید >>> کیسه دیالیز

 کاربرد

پودر تریپسین گرید کشت سلول یا تریپسین از پانکراس خوک در موارد زیر استفاده شده است:

  • برای تریپسین دایجستشن پپتیدها، از نسبت حدود 1: 100 به 1:20 برای تریپسین: پپتید استفاده کنید. کاربرد معمول این محصول در حذف و جداسازی سلول‌های چسبنده از سطح فلاسک کشت است. غلظت تریپسین لازم برای حذف و جداسازی سلول‌ها از بستر پلیت کشت سلول در درجه اول به نوع سلول و سن کشت بستگی دارد. از تریپسین برای تعلیق و کشت مجدد سلول‌ها در تحقیقات پروتئومیکس برای هضم پروتئین‌ها و هضم‌های مختلف در ژل استفاده شده است. پودر تریپسین در ارزیابی کریستالیزاسیون با استفاده از تکنیک‌های مبتنی بر غشا و در یک مطالعه برای تعیین میزان فولدینگ پروتئین استفاده شده است.
  • از تریپسین موجود در پانکراس خوک برای هضم و دایجست استخوان مرغ استفاده شده است.
  • همچنین پودر تریپسین گرید کشت سلول در جداسازی سلول‌های اندوتلیال لوتئال استفاده شده است.
  • از تریپسین ممکن است برای جداسازی سلول‌های چسبنده از سطح ظرف کشت استفاده شود. سلول‌ها معمولاً با تریت تریپسین با یا بدون EDTA از بستر ظرف کشت خارج می‌شوند. دامنه غلظت تریپسین می‌تواند از 0.025٪ تا 0.5٪ بسته به فعالیت یا قدرت تریپسین، زمان‌های مختلف انکوباسیون و رده‌های مختلف سلولی متفاوت باشد.

عملکرد بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی

تریپسین رزیدوهای لیزین و آرژنین پپتیدها را در ناحیه C-ترمینال می‌شکند. اگر یک رزیدوی اسیدی در دو طرف محل برش باشد، سرعت هیدرولیز واکنش تریپسین را کاهش می‌یابد و اگر یک باقیمانده پرولین در سمت کربوکسیل محل شکاف باشد، هیدرولیز متوقف می‌شود. pH مطلوب برای فعالیت تریپسین بین 7-9 است.

مطالعه کنید >>> آزمایش MTT چیست ؟

تریپسین همچنین می‌تواند برای شکستن پیوندهای استری و آمیدی از مشتقات سنتتیک اسیدهای آمینه عمل کند. ماده كلاته كننده EDTA یون‌های كلسیم و منیزیم که پیوندهای پپتیدی را كه تریپسین در آن‌ها عمل می‌کند، را پنهان می‌کند خنثی می‌کند و  به محلول‌ تریپسین اضافه می‌شود. حذف این یون‌ها فعالیت آنزیمی را افزایش می‌دهد. مهارکننده‌های سرین پروتئیناز، ازجمله DFP ، TLCK ، APMSF ، AEBSEF و آپروتینین، و غیره ، تریپسین را مهار می‌کنند.

تریپسین از یک پلی پپتید تک زنجیره‌ای که از 223  اسیدآمینه تشکیل شده است که با حذف هگزاپپتید N-ترمینال تریپسینوژن تولید می‌شود که در پیوند پپتیدی Lys – lle شکسته می‌شود.

توالی اسیدهای آمینه توسط 6 پیوند پل دی سولفید به‌هم‌پیوسته است. این شکل نیتیو تریپسین، بتا تریپسین است. بتا-تریپسین می‌تواند اتولیز شود و با تجزیه باقیمانده Lys-Ser، آلفا-تریپسین تولید کند. تریپسین عضوی از خانواده سرین پروتئاز است.

تريپسينيزاسيون فرآیند تفکیک سلولی است که با استفاده از آنزیم پروتئولیتیک تریپسین سلول‌های چسبنده را از فلاسک کشت جدا می‌کند. تریپسین هنگامی‌که به یک کشت سلول اضافه می‌شود، پروتئین‌هایی متصل‌کننده سلول به فلاسک کشت را می‌شکند.

تريپسينيزاسيون غالباً براي انتقال سلول به محیط کشت جدید استفاده می‌شود. هنگامی‌که روند تریپسین سازی به پایان رسید، سلول‌ها در حالت سوسپانس قرار می‌گیرند.

سلول‌ها اغلب در ظروفی کشت می‌شوند که به شکل فلاسک یا صفحه پلاستیکی هستند. در چنین ظروفی، سلول‌ها دارای محیط رشد متشکل از مواد مغذی ضروری موردنیاز برای تکثیر هستند و سلول‌ها هنگام رشد به ظرف و یکدیگر می‌چسبند.

این فرایند کشت سلولی یا کشت بافتی به روشی برای جداسازی سلول‌ها از ظرف و یکدیگر نیاز دارد. تریپسین ، آنزیمی که معمولاً در دستگاه گوارش یافت می‌شود ، می‌تواند برای “هضم” پروتئین‌های چسبندگی به ظرف و بین سلول‌ها هضم شود.

هنگامی‌که سلول‌ها از ظرف کشت شدند، لازم است تریپسین غیرفعال شود، زیرا پروتئین‌های سطح سلول نیز باگذشت زمان شکسته می‌شوند و این بر عملکرد سلول تأثیر می‌گذارد. تریپسین توسط سرم حاوی که کاتیون‌های دو ظرفیتی مانند کلسیم و منیزیم که درروند سیگنالینگ درون‌سلولی و درون‌سلولی نقش دارند، مهار می‌شود.

دمای نگه‌داری

دمای 20- درجه سانتی‌گراد

برای مشاهد محصول در سایت اصلی بر روی اینجا کلیک نمایید .

 

ادامه مطلب
مقدار

5 گرم
10 گرم
25 گرم

برند

Sigma-Aldrich

نام محصول به فارسی

پودر تریپسین گرید کشت سلول

نام محصول به انگلیسی

Trypsin from porcine pancreas
lyophilized powder
BioReagent
suitable for cell culture
1,000-2,000 BAEE units/mg solid

Cas number

9002-07-7

Catalogue Number

T4799

دمای نگه داری

دمای 20- درجه سانتی‌گراد

مشخصات محصول بر روی سایت سازنده

همین حالا مشاهده کنید

پروتکل و مستندات

دانلود دفترچه راهنما

آماده‌سازی
پودر لیوفیلیزه پودر تریپسین گرید کشت سلول با غلظت 25 میلی‌گرم در میلی‌لیتر محلول بافر هنکس Hank′s محلول است. برای آزمایش‌هایی که نیاز به EDTA است، باید محلول‌های بافر نمکی عاری از یون‌های كلسیم و منیزیم باشد.
روش تريپسينيزاسيون یا تريپسينه کردن جهت پاساژ سلولی
1) با آسپیراسیون محیط کشت را از فلاسک کشت خارج کرده و تک لایه را با محلول‌ بافر نمکی عاری از یون‌های كلسیم و منیزیم بشویید تا تمام آثار سرم از بین رود. سپس محلول‌ بافر نمکی را با آسپیراسیون خارج کنید.
2) به اندازه کافی تریپسین یا تریپسین EDTA را در فلاسک کشت اضافه کنید تا تک لایه سلول‌ها کاملاً پوشانده شود و تقریباً به مدت 2 دقیقه در 37 درجه سانتی‌گراد قرار دهید.
3) محلول تریپسین یا تریپسین EDTA را با آسپیراسیون خارج کرده و ظرف کشت را در انکوباتور قرار دهید. سلول‌های پوشش داده‌شده تا زمان جدا شدن سلول‌ها از سطح مجاز به انکوباسیون هستند. روند کار را می‌توان با میکروسکوپ فاز معکوس بررسی کرد.
توجه: زمان لازم برای حذف سلول‌ها از سطح کشت به نوع سلول، تراکم جمعیت سلولی، غلظت سرم در محیط کشت، قدرت تریپسین و زمان انکوباسیون بستگی دارد.
4) با تکمیل فرآیند تریپسین سازی ، سلول‌ها در حالت تعلیق قرار می‌گیرند و گرد می‌شوند.
5) توصیه می‌شود هرچه سریع‌تر سرم یا محیط حاوی سرم به سوسپانسیون سلولی اضافه شود تا از فعالیت تریپسین که ممکن است به سلول‌ها آسیب برساند، جلوگیری کند.
6) سلول‌ها با پیپتینگ آرام برای حذف کلامپ‌ها، سوسپانس می‌شوند.
احتیاط
محلول تریپسین در 1 میلی مولار اسید هیدروکلریک (HCl) به مدت 1 سال در دمای 20- درجه سانتی‌گراد پایدار هست. وجود یون‌های کلسیم کارایی اتولیز خود به خودی تریپسین کاسته و پایداری آن را در محلول حفظ می‌کند. تریپسین همچنین بیشترین فعالیت خود را در اوره 2 مولار، گوانیدین‌ هیدروکلراید 2 مولار، 0.1٪ SDS حفظ می‌کند.
انکوباسیون سلول‌ها با غلظت بالای تریپسین برای مدت‌زمان طولانی باعث آسیب رساندن به غشای سلول و از بین رفتن سلول‌ها می‌شود. اگر در مورد غلظت تریپسین برای استفاده مطمئن نیستید، از غلظت کم شروع کنید.

.فقط مشتریانی که این محصول را خریداری کرده اند و وارد سیستم شده اند میتوانند برای این محصول دیدگاه ارسال کنند.

دیدگاهها

هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.

اگر سوالی درباره محصول دارید اینجا بپرسید

هنوز هیچ سوالی وجود ندارد. اولین کسی باشید که برای این محصول سوالی مطرح می کنید.