کیت بافر لیز کننده ریپاRIPA Lysis Buffer System

پاک کردن
ویژگی های محصول
  • برند : سانتا کروز
  • CAS نامبر : -
  • Catalogue نامبر : sc-24948
  • مترادف : -
  • دمای نگهدارنده : دمای 20- درجه سانتی‌گراد
  • + موارد بیشتر - بستن
  • فروش توسط فروشگاه ATR-MED
  • با ضمانت ATR-MED
  • ارسال از انبار ATR-MED
  • بسته بندی توسط ATR-MED

۱,۸۰۰,۰۰۰ تومان

محصولات مرتبط

نقد و بررسی

کیت بافر لیز کننده ریپا

  • نام انگلیسی محصول: RIPA Lysis Buffer System
  • نام فارسی محصول: بافر لیز کننده ریپا
  • برند: Santa Cruz
  • کاتالوگ نامبر: sc-24948
  • گرید: بیولوژی مولکولی

توضیحات کلی

کیت بافر لیز کننده ریپا RIPA (Radioimmunoprecipitation) برای لیز سلول‌ها و بافت‌ها در آزمایش ایمونوپرسیپیتاسیون مورد استفاده قرار می‌گیرد. بافر لیز کننده RIPA توانایی دناتوراسیون قویتری نسبت به تریتون X-100 (Triton X-100) یا NP-40 دارد و برای تخریب غشاهای هسته‌ای در پروسه استخراج هسته استفاده می‌شود.

بافر استخراج  و لیز RIPA حاوی دترجنت های غیر یونی و یونی است که قادر به استخراج پروتئین از انواع مختلف سلول‌ها و ساختارهای غشایی و بافت‌ها هستند. بافر RIPA باعث لیز سلول می‌شوند و از تخریب پروتئین و تداخل آن در واکنش‌پذیری ایمونولوژیکی و فعالیت بیولوژیکی آن جلوگیری می‌کند.

ازآنجاکه اکثر آنتی‌بادی‌ها و آنتی‌ژن‌های پروتئینی تأثیر منفی بر اجزای تشکیل دهنده این کیت را ندارند، استخراج پروتئین با کیت بافر لیز کننده ریپا با انواع مختلف روش‌های ایمونولوژیکی و بیولوژی مولکولی ازجمله سنجش پروتئین، وسترن بلاتینگ و تخلیص پروتئین سازگار است. بافر RIPA اینتراکشن اتصالی غیراختصاصی پروتئین‌ها را به حداقل می‌رساند، درحالی‌که امکان ایجاد بیشترین اینتراکشن اتصالی اختصاصی را فراهم می‌کند، امکان مطالعات متقابل پروتئین و پروتئین را فراهم می‌کند.

بافر لیز کننده RIPA حاوی مهارکننده‌های پروتئاز است، و برای استفاده مستقیم در سلول‌های پستانداران و لیز بافت آماده است و به‌صورت 4 ویال مجزا ازهم ارائه می‌شود که بلافاصله قبل از استفاده ترکیب می‌شوند. این محصول شرکت سانتا کروز می باشد و بسیار پرطرفدار مشتریان است .

دمای نگه‌داری

دمای 20- درجه سانتی‌گراد

ادامه مطلب
مقدار

50 میلی لیتر

برند

سانتا کروز

نام محصول به فارسی

کیت بافر لیز کننده ریپا

نام محصول به انگلیسی

RIPA Lysis Buffer System

Catalogue Number

sc-24948

دمای نگه داری

دمای 20- درجه سانتی‌گراد

مشخصات محصول بر روی سایت سازنده

همین حالا مشاهده کنید

پروتکل و مستندات

محتویات:
• ویال 1: 50 میلی‌لیتر بافر لیز X1 (pH 7.4 ± 0.1)
• ویال 2: 500 میکرولیتر PMSF 200 میلی‌مولار در دی متیل سولفوکساید (DMSO)
• ویال 3: 500 میکرولیتر کوکتل مهارکننده‌ی پروتئاز (Protease Inhibitor Cocktail) در DMSO
• ویال 4: 500 میکرولیتر سدیم ارتووانادات 100 میلی‌مولار در آب

پروتکل :

بلافاصله قبل از ليز كردن سلول‌ها، 10 ميكروليتر محلول PMSF، 10 ميكروليتر محلول آرتونوادات سديم و 10-20 ميكروليتر کوکتل مهارکننده‌ی پروتئاز (Protease Inhibitor Cocktail) در هر میلی‌لیتر از بافر لیز X1 براي آماده كردن بافر لیز کننده ریپا RIPA مخلوط كنيد.
• از 3 میلی‌لیتر بافر لیز کننده ریپا RIPA به ازای هر گرم از بافت استفاده کنید.
• یا 1 میلی‌لیتر بافر لیز کننده ریپا RIPA به ازای 107×2 سوسپانسیون سلولی استفاده کنید.
• 0.6 میلی‌لیتر بافر لیز کننده ریپا RIPA به ازای کشت تک لایه تحت ﻛﺎﻧﻔﻠﻮﺋﻨﺴﻲ در یک پلیت 100 میلی‌متر استفاده کنید.

تهیه نمونه :
روش‌های آماده‌سازی نمونه برای سلول‌های تک لایه، سوسپانسیون سلولی و نمونه‌های بافتی ارائه شده است:

سلول‌های تک لایه :

سلول‌ها را در پتری دیش 100 میلی‌متر در 20 میلی‌متر کشت دهید، محیط کشت را برداشته و تک لایه سلول در دمای اتاق بل 1 برابر PBS بشویید. مراحل زیر را باید روی یخ یا در دمای 4 درجه سانتی‌گراد با استفاده از بافرهای تازه انجام شود. 0.6 میلی‌لیتر بافر لیز کننده ریپا را به سلول‌های تک لایه داخل اضافه کنید. صفحه را به‌آرامی و به مدت 15 دقیقه در دمای 4 درجه سانتی‌گراد تکان دهید، سلول‌های چسبنده را با اسکارپر جدا کنید. محلول لیز حاصل را به یک میکروتیوب منتقل کنید. یکبار دیگر پتری دیش را با 0.3 بافر لیز کننده ریپا بشویید و با لیزات اول ترکیب کنید. (مرحله اختیاری: 10 میکرولیتر از PMSF با غلظت 10 میلی‌گرم در میلی‌لیتر ماده اضافه کنید و یا از طریق یک سرسوزن گیج ۲۱ DNA را برش دهید.) 30-60 دقیقه روی یخ انکوبه کنید. سلول‌ها به مدت 10 دقیقه در دور g×10.000 در دمای 4 درجه سانتی‌گراد سانتریفوژ کنید. مایع رویی ماده حاوی توتال پروتئین سلول است. مایع رویی را به یک میکروتیوب جدید منتقل کنید. این محلول برای افزایش بازیابی پروتئین، رسوب را در حجم کمی از بافر لیز کننده ریپا، دوباره سانتریفوژ کرده و مواد رویی را با مایع رویی مرحله قبل ترکیب کنید.

سوسپانسیون سلولی :
تقریباً 107×2 سوسپانسیون سلولی را با دور پایین (به‌عنوان مثال g×200) در دمای اتاق به مدت 5 دقیقه سانتریفیوژ کنید. محیط کشت را با دقت از بیرون خارج کنید. رسوب را با PBS در دمای اتاق بشویید و دوباره سوسپانسیون سلولی را با سانتریفیوژ با دور پایین جمع کنید. مایع رویی را بااحتیاط خارج کنید. 1. 1 میلی‌لیتر بافر لیز کننده ریپا RIPA را به آن اضافه کنید. سلول‌ها را به‌راحتی با پیپت در بافر RIPA حل كرده و به مدت 30 دقیقه روی یخ انكوبه كنید. سلول‌ها را با برش هیدرودینامیكی (سرسوزن گیج ۲۱) یا سونیکاسیون همگن كنید، و مراقب باشید كه درجه حرارت لیزات سلولی افزایش نیابد. (مرحله اختیاری: 10 میکرولیتر از PMSF با غلظت 10 میلی‌گرم در میلی‌لیتر ماده اضافه کنید) 30 دقیقه روی یخ انکوبه کنید و سپس به مدت 10 دقیقه در دور g×10.000 در دمای 4 درجه سانتی‌گراد سانتریفوژ کنید. مایع رویی ماده حاوی توتال پروتئین سلول است. مایع رویی را به یک میکروتیوب جدید منتقل کنید. این محلول برای افزایش بازیابی پروتئین، رسوب را در حجم کمی از بافر لیز کننده ریپا، دوباره سانتریفوژ کرده و مواد رویی را با مایع رویی مرحله قبل ترکیب کنید.

نمونه‌های بافتی :
با استفاده از تیغ تمیز نمونه‌های بافتی را به قطعات بسیار کوچک برش دهید. بافت منجمد باید خیلی نازک و خردشده در بافر لیز کننده ریپا حل شود. به ازای هر گرم بافت از 3 میلی‌لیتر بافر سرد RIPA اضافه کنید. با استفاده از هموژنایزر یا سونیکاسیون ، بافت را بیشتر همگن کنید و در 4 درجه سانتی‌گراد انکوبه کنید. (مرحله اختیاری: 10 میکرولیتر از PMSF با غلظت 10 میلی‌گرم در میلی‌لیتر ماده اضافه کنید) 30 دقیقه روی یخ انکوبه کنید و سپس به مدت 10 دقیقه در دور g×10.000 در دمای 4 درجه سانتی‌گراد سانتریفوژ کنید. مایع رویی ماده حاوی توتال پروتئین سلول است. مایع رویی را به یک میکروتیوب جدید منتقل کنید. این محلول برای افزایش بازیابی پروتئین، رسوب را در حجم کمی از بافر لیز کننده ریپا، دوباره سانتریفوژ کرده و مایع رویی را با مایع رویی مرحله قبل ترکیب کنید.

.فقط مشتریانی که این محصول را خریداری کرده اند و وارد سیستم شده اند میتوانند برای این محصول دیدگاه(نظر) ارسال کنند.

نقد و بررسی‌ها

هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.

اگر سوالی درباره محصول دارید اینجا بپرسید

هنوز هیچ سوالی وجود ندارد. اولین کسی باشید که برای این محصول سوالی مطرح می کنید.