سبد خرید 0
سبد خرید 0

آزمایشMTT چیست؟

روز به روز تکنولوژی دانش های مختلف  دچار پیشرفت میشوند. یکی از این علوم، زیست شناسی است. که در این مدت اخیر بسیار دچار تحول و پیشرفت شده است. در این علم تحقیق و مطالعه راجع به سلول های زیستی اهمیت بالایی دارد. آزمایشMTT هم در واقع یک تست است که میزان زنده ماندن یا مرگ و یا تاکثیر سلول ها را تحت شرایط مختلف مورد بررسی و آنالیز قرار میدهد. تیم آثل طب در ادامه قصد دارد به بررسی این تست یا آزمون بسیار مهم و کاربردی بپردازد. با ما همراه باشید.

پیشنهاد می کنیم ، قبل از مطالعه این مطلب ، مقاله ” سنجش میزان زنده ماندنی سلول و سمیت مواد با آزمایش MTT و XTT ” را بخوانید .

خلاصه ای از آزمایشMTT ؟

تستMTT  مخفف   MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromideمیباشد. به معنای ساده آزمایشMTT روشی ساده برای بررسی بقای سلولی تحت مصرف برای مثال یک دارو یا ماده است و هدف این است که اثر سمیت ترکیبات، داروها یا دیگر مکمل ها روی سلول بررسی شود.

آزمایشMTT

این روش بر اساس رنگ سنجی انجام میشود. به این صورت که کریستال های زرد رنگ تترازولیوم را مورد بررسی قرار میدهد. و تغییرات آن به وسیله آنزیم سوکسینات دهیدروژنازبه عنوان نتیجه تست بیان میشود.

مطالعه کنید >>> بررسی چرخه سلولی با استفاده از رنگ PI

پیش به سوی انجام تستMTT ؟

در ابتدا باید گفت که این آزمایش سه مرحله دارد: کشت سلولی (Seeding)، تیمار Treatment) و در نهایت  آنالیز MTT )

مطلب قابل این است که هرکدام از این مراحل یک روز زمان میبرد.

نکته ی قابل توجه این است که این آزمایش یکی از قابل اطمینان ترین آزمایش های زیستی و بیوتکنولوژی میباشد. از مهم ترین دلایل قابل اطمینان بودن این روش نسبت به بقیه تست ها، دقت زیاد این تست در تشخیص سلول های زنده از مرده میباشد.

آزمایشMTT

در ابتدای امر ماده تترازولیوم که ابتدایی و مهم ترین ماده این تست است، به صورت پودری همراه با ماده PBS استفاده میشود. با ترکیب  این  دو ماده محلولی بدست می آید که به شدت به نور حساس است و رنگ زرد هم دارد. با بار مثبت خود جذب غشای سلول ها می شود. پس از طی این مراحل این محلول زرد رنگ به کمک اندوسیتوز وارد سلول ها میشود و به میتوکندری می رود.

مطالعه کنید >>> بررسی آپوپتوز با استفاده از کیت Annexin

این ماده در میتوکندری بوسیله ی سوکسینات دهیدروژنازِمیتواند در سلول های تنفسی سلول فعالیت کرده، و در آنجا به رسوب هایی به رنگ بنفش تبدیل شود. درواقع این مسئله یعنی اگر سلول های موجود دستگاه زنده باشند، بخاطر آنزیم سوکسینات دهیدروژنازِ به رنگ بنفش نشان داده شده و قابل تشخیص  است.

آزمایشMTT

جهت تشخیص رنگ محلول حاصل از دستگاهی به نام اسپکتروفتومتر استفاده میکنیم. این دستگاه قادر است تراکم نوری سلول های زنده را در طول موج ۵۷۹ نانومتر با طول موج مبنای ۶۳۰ نانومترمشخص نماید.

مطالعه کنید >>> فروش مواد شیمیایی

برای انجام آزمایشMTT  فارغ از دستگاه اصلی آن به برخی تجهیزات نیازداریم. برای استریل سازی ظروف شیشه ای نیاز به اتوکلاو است. برای گرم کردن محیط کشت و باز کردن نمونه فریز شده نیاز به بن ماری میباشد. برای جدا سازی سلول ها از سانتریفیوژ ها استفاده میکنیم. و از میکروسکوپ نوری invert نیز برای دیدن سلول ها استفاده میکنیم. همچنین در محیط  آزمایشگاهی برای جلوگیری از پخش بو یا گاز های سمی از هود آزمایشگاهی کلاس II استفاده میکنیم.

دستگاه Eliza Reader چیست؟

دستگاه Eliza Reader دستگاهیست که بوسیله ی آن  نتايج آزمايش MTT خوانده میشود. این دستگاه قادر به تعیین آنتی بادی ها در سیستم بصورت مستقیم میباشد.

مطالعه نمایید >>> آزمایشگاه کشت سلول شرکت atr-med را بیشتر بشناسید

نکات مهم آزمایشMTT

نکات مهم آزمایشMTT

  1. بهتر است برای هر سلول 3 بار آزمایش انجام شود تا درصد خطا کاهش پیدا کند.
  2. تعداد سلول های مجاز درون چاهک باید بین 103 تا 105 سلول باشد.
  3. مقدار سلول های درون چاهک به هیچ وجه نباید بیشتر یا کمتر از مقدار گفته شده باشد. و حتما باید به طور دقیق شمارش شود.
  4. باید از طریق مقالات یا تحقیقات زمان اثر هر دارو را بطور دقیق بدست آوریم. زیرا برای انجام تست بسیار مهم و حیاتی است.
  5. دقت و تمرکز زیاد برای انجام این آزمون بصورت هر چه دقیق تر مهم ترین مسئله میباشد. که حتما باید در محیطی مناسب انجام شود.

جمع بندی:

در این گفتاره به بررسی تست MTT  که یکی از قابل اعتماد ترین آزمایش ها و آزمون های رشته ی بیوتکنولوژی است پرداختیم. این ازمایش معمولا برای سنجش کیفیت اثر بخشی یک سلول انجام میشود. و بررسی میکند که میزان تکثیر، بقا و فعالیت های سلول مد نظر تحت وارد کردن دارو ها یا هورمون ها چقدر است. شرکت atrmed یکی از ارائه دهندگان خدمات MTT در ایران می باشد . شما می توانید برای آشنایی بیشتر با شرکت atrmed به صفحه درباره ما مراجعه نمایید و یا برای ارتباط با گروه پشتیبانی همین حالا به صفحه تماس با ما مراجعه کنید .

خرید کنید

 

محصول با موفقیت به سبد خرید اضافه شد.